預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker（3.3kD-31.0kD)-蛋白電泳/marker-蛋白與免疫
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預(yù)染超低分子量蛋白質(zhì)Marker（3.3kD-31.0kD)| 英文名稱 | Prestained Protein Marker(3.3kD-31.0kD) |
|---|---|
| 儲存條件 | -20℃保存，有效期為一年。避免反復(fù)凍融，建議分裝凍存 |
產(chǎn)品簡介
本產(chǎn)品包含預(yù)染的3種多肽和2種低分子量蛋白質(zhì)組成，分子量范圍為3. 3kD-31. 0kD。可以用于直接觀察蛋白質(zhì)電泳狀況以及清晰地判斷Western Blot的轉(zhuǎn)膜效果。經(jīng)Tricine-甘油SDS-PAGE凝膠電泳時以及轉(zhuǎn)移到PVDF或NC膜上可看到清晰的5條藍色的蛋白條帶。本品為蛋白質(zhì)和多肽混合物的凍干粉，每種預(yù)染蛋白含量約為40μg，配有一支1×上樣緩沖液。
使用說明:
1. 開封后，溶于200 μ11×上樣緩沖液，可根據(jù)需要進行小量分裝，每管10 μl，-20℃貯存，每次取一管使用，避免反復(fù)凍融。
2. 使用前取分裝后的小管室溫融化后即可上樣電泳。
示意圖：
凝膠制備及染色注意事項:
1. 先配制分離膠，聚合后再配制夾層膠，最后配制濃縮膠，3種膠的制膠體積比為4:1.5:1。電泳時，30V跑1-2h后，待指示前沿到達分離膠上沿時，把電壓調(diào)至100V，至電泳結(jié)束，整個電泳過程大約需要6-8h。
2. 電泳之后可將膠置于固定液中固定20min，再進行染色，能得到較好的蛋白條帶；如時間不允許，也可不進行固定直接染色。如果使用配方7進行染色時效果不好或考慮其毒性，請選擇本公司的考馬斯亮藍蛋白膠快速染色液(貨號:P1300)，該產(chǎn)品具有染色快，無毒，靈敏性高等特點，是常規(guī)染色液的替代品。
3. 由于多肽所含的氨基酸數(shù)目較少，因此如該多肽含有過多的極性氨基酸(堿性或酸性)，則會影響其在SDS-PAGE圖上的條帶遷移率，即其表觀分子量可能和多肽的氨基酸理論推算分子量有一定距離。
4. 由于SDS-PAGE的圖譜上，蛋白質(zhì)對數(shù)分子量和遷移率成正比直線關(guān)系的分子量范圍為15,000-200,000，因此對于分子量小于10000的蛋白質(zhì)或多肽的分子量，只能根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)分子量進行估計，推斷其是否落入預(yù)測的分子量范圍。
5. 由于超低分子量多肽（3000及3000以下），極易從凝膠上浸出，因此染色及脫色時間不宜太長，脫色后凝膠也不宜在水中浸泡保存過久，否則條帶會消失。
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