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10×多聚賴氨酸-切片與免疫組化-蛋白與免疫

2023-10-29

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10×多聚賴氨酸

英文名稱Poly-L-lysine Solution,10×
儲(chǔ)存條件-20℃保存,有效期2年
純度1mg/ml

產(chǎn)品非無菌

原理:

多聚賴氨酸溶液是廣泛應(yīng)用的組織切片與玻片黏合劑,該多聚陽離子分子與組織切片上的陰離子相互作用會(huì)產(chǎn)生較強(qiáng)的黏合力。培養(yǎng)瓶表面的性質(zhì)對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)至關(guān)重要,細(xì)胞表面的糖蛋白(陰性)易于吸附在親水性的表面上,因而細(xì)胞培養(yǎng)表面如果有相當(dāng)含量的陽性電荷更能促進(jìn)細(xì)胞吸附,這正是運(yùn)用多聚賴氨酸優(yōu)化細(xì)胞培養(yǎng)表面的重要所在。 應(yīng)用: 適用組織學(xué),免疫組織化學(xué),冰凍切片,細(xì)胞涂片,原位雜交等使用的玻片的防脫片處理,以防實(shí)驗(yàn)操作過程中組織掉片。也可用于細(xì)胞培養(yǎng),增加細(xì)胞貼壁能力。 玻片處理: 1. 滅菌水稀釋聚賴氨酸溶液,一般的使用濃度為0.01%。 2. 將玻片浸在稀釋的多聚賴氨酸溶液5分鐘。注意增加時(shí)間不會(huì)提高包被效果。 3. 在60℃烘箱1小時(shí)干燥,或室溫18-26℃過夜干燥待用。 注意: 1. 每100mL已稀釋的多聚賴氨酸溶液要包被的玻片40-90張, 超過90張片子將影響其黏合力。 2. 用之前的玻片必須保持清潔。必要時(shí)用含1% HCl的70%乙醇溶液來清洗。 3. 釋過的多聚賴氨酸溶液要放在2-8℃,至少在3個(gè)月內(nèi)是穩(wěn)定的。 4. 用過的稀釋液要過濾,若出現(xiàn)渾濁或長(zhǎng)菌要丟棄 5. 多聚賴氨酸濃度可以高一些,吸出來的可以重復(fù)利用至少20次。 培養(yǎng)瓶處理: 1. 包被培養(yǎng)板或者是培養(yǎng)瓶,一般多聚賴氨酸濃度為0.01%, 2. 準(zhǔn)備100ml三蒸水,經(jīng)高壓滅菌處理。 3. 0.01%的多聚賴氨酸以50微升每平方厘米的量均勻涂于培養(yǎng)底物的表面,室溫下靜置5min,吸除多余液體。 4. 加入滅菌水,反復(fù)沖洗三次,無菌操作。 5. 處理后無菌晾干備用。 6. 回收后保持無菌的多聚賴氨酸可反復(fù)利用。

常用的配合物質(zhì)可分為五類:

1、酒精,使用量為30~70%,主要應(yīng)用于各種蛋制品。

2、有機(jī)酸,常常使用的有機(jī)酸一般有:醋酸、蘋果酸、馬來酸、檸檬酸、琥珀酸等,使用量在0.5~50%之間,主要應(yīng)用于米飯、飲料、色拉、醬類等食品;

3、甘油酯,甘油酯多為低級(jí)脂肪酸酯,用量在0.01~5%之間,主要用于動(dòng)物性蛋白,乳蛋白較多的食品。

4、甘氨酸,用量為0.01~10%;主要應(yīng)用于牛奶防腐。

5、其它天然抑菌劑,如:魚精蛋白、茶多酚等。

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