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thermo FastDigest SalI快速內切酶貨號FD0644

單位：200U

賽默飛世爾科技近期推出Thermo Scientific Fermentas FastDigest快速酶，是為快速DNA酶切專門研發(fā)的進階版限制性內切酶。在30年的內切酶研究當中，我們積累的限制性內切酶生產(chǎn)菌株庫是業(yè)內zui大的限制性內切酶生產(chǎn)菌株庫之一。大量可供選擇的同裂酶和優(yōu)異的生產(chǎn)能力促進了這個包含176種FastDigest快酶的*系統(tǒng)的誕生。

所有FastDigest快速酶在通用的FastDigest緩沖液和FastDigest Green綠色緩沖液中都具有100%活性，并可在5-15分鐘內迅速完成酶切。這就使得任意限制酶組合都能夠在同一反應管中同時反應，避免了連續(xù)酶切。此外，F(xiàn)astDigest Green綠色緩沖液兼具上樣緩沖液的功能，可直接將反應物上樣凝膠電泳，操作更為便利。

FastDigest快速酶可用于酶切質粒、基因組DNA、病毒DNA以及PCR產(chǎn)物。酶切時間和實驗方案已經(jīng)過實驗驗證，每種快速酶及其作用的模板都有相應的酶切時間和實驗方案提供。FastDigest系列尤其適合對于反應組分純度、性能穩(wěn)定性和反應體系配制簡單化要求*的應用。

thermo FastDigest SalI快速內切酶貨號FD0644

應用

快速克隆分析快速制備克隆用DNAPCR產(chǎn)物酶切快速RFLP基因分型難切割DNA片段的酶切

通用緩沖液和直接凝膠上樣

所有FastDigest快酶在FastDigest Green綠色緩沖液中都具有100%活性。此外FastDigest Green綠色緩沖液中還包含密度試劑和兩種示蹤染料，從而可直接將反應產(chǎn)物添加到點樣孔中。藍色染料在1%瓊脂糖凝膠

中的遷移率與3-5kb DNA片段接近， 并在424nm時出現(xiàn)激發(fā)峰；而黃色染料在1%瓊脂糖凝膠中的遷移速度稍快于10bp DNA片段，在615nm時出現(xiàn)激發(fā)峰。

FastDigest Green綠色緩沖液和無色緩沖液一樣可進行高性能的DNA酶切和下游應用。對于需要用熒光激發(fā)進行酶切產(chǎn)物分析的應用（例如，在紫外光下測量濃度），我們建議使用無色的FastDigest緩沖液。

FastDigest Green綠色緩沖液

含有FastDigest Green綠色緩沖液的反應混合物

A: 電泳前，加入點樣孔中的反應混合物；B: 電泳后，在凝膠中得到分離的條帶

用FastDigest快速酶在FastDigest Green綠色緩沖液中5分鐘內進行質粒DNA的三重酶切和連接

M：Thermo Scientific Fermentas GeneRuler Express DNA Ladder （#SM1551）

C：未酶切的質粒DNA對照

1：在FastDigest緩沖液中用FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI對質粒DNA進行三重酶切；2：在FastDigest緩沖液中的酶切和連接反應混合物

3：在FastDigest Green綠色緩沖液中用FastDigest EcoRI、FastDigest KpnI和FastDigest SmaI對質粒DNA進行三重酶切；4：在FastDigest Green綠色緩沖液中的酶切和連接反應混合物

5分鐘內酶切DNA

在1種緩沖液中5-15分鐘內可 進行雙重和多重酶切高通量應用的理想選擇所有種類的DNA模板都提供相應的酶切時間：質粒DNA、PCR產(chǎn)物、基因組DNA任何模板都不需要酶切過夜沒有星活性——無需延長孵育時間

用FastDigest酶和傳統(tǒng)內切酶進行質粒DNA酶切的比較

M：GeneRulerTM 1kb Plus DNA Ladder；C：未酶切的質粒DNA

1：用FastDigest Xhol 5分鐘內酶切質粒DNA；2：用FastDigest ApaI 5分鐘內酶切質粒DNA

3：用FastDigest Xhol和FastDigest ApaI 5分鐘內雙酶切質粒DNA；4：用Apal酶切質粒DNA 1小時

5：用Xhol酶切質粒DNA 1小時；6：在1X Tango緩沖液中用4倍的ApaI過量酶切質粒DNA 1小時，然后在2X Tango緩沖液中用XhoI再酶切1小時

雙酶切可節(jié)省超過2個小時

FastDigest限制性內切酶為DNA酶建立新的標準