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天恩澤柱式動物RNA提取試劑盒 71201-50，產(chǎn)品簡介：
產(chǎn)品品牌：天恩澤
產(chǎn)品名稱：柱式動物RNA提取試劑盒
英文名稱：Column Animal RNAOUT
產(chǎn)品貨號：71201-50
產(chǎn)品規(guī)格：50次

天恩澤柱式動物RNA提取試劑盒 71201-50

我們上海金山科研平臺公司作為天恩澤公司的代理商，先簡單介紹一下天恩澤公司：

北京天恩澤公司的目標是研發(fā)出技術(shù)先進、質(zhì)量穩(wěn)定、價格合理的試劑精品。公司的創(chuàng)立宗旨是技術(shù)至上、質(zhì)量至上、服務(wù)至上，公司的產(chǎn)品研發(fā)團隊均為高學(xué)歷并在海外有長期的科研經(jīng)驗；公司的管理團隊已在行業(yè)內(nèi)擁有超過20年管理經(jīng)驗；同樣，公司的運營團隊也有豐富的執(zhí)行經(jīng)驗。

北京天恩澤公司充分了解客戶的需求，并努力創(chuàng)新以滿足客戶不斷發(fā)展的需求。我們將與我們的客戶共同成長，成為生物技術(shù)領(lǐng)域中zhuoyue產(chǎn)品和服務(wù)的jijia提供者。

DNAout、RNAout、Erasol、天凈沙、克必隆、歸去來、好亦多均為天恩澤基因注冊商標(試劑類)。

天恩澤柱式動物RNA提取試劑盒

天恩澤柱式動物RNA提取試劑盒 71201-50，產(chǎn)品簡介：

產(chǎn)品品牌：天恩澤

產(chǎn)品名稱：柱式動物RNA提取試劑盒

英文名稱：Column Animal RNAOUT

產(chǎn)品貨號：71201-50

產(chǎn)品規(guī)格：50次

產(chǎn)品價格：690元

運輸：常溫

保存：常溫

有效期：1年

貨期：現(xiàn)貨

天恩澤柱式動物RNA提取試劑盒 71201-50，產(chǎn)品及特點：

本產(chǎn)品是天澤基因動物總RNA 快速提取試劑動物 RNAOUT（CAT#：3070） 的柱式升級產(chǎn)品，可用于從各種動物組織（包括白細胞）快速提取總 RNA。跟

動物 RNAOUT相比其主要特點是：

1. 操作更加簡單快速，整個過程只需要不到十分鐘（對一個樣品而言）。

2. RNA 純度更高，OD260/OD280 一般在2.0 左右。

3. 一般不含用 RT-PCR可以檢測到的基因組 DNA污染。

4. 適用于培養(yǎng)細胞、大部分動物組織和部分植物組織。

5. 得到的 RNA可直接用于 RT-PCR、Northern 雜交、cDNA合成等實

驗

6. 性價比高于進口的柱式 RNA 提取產(chǎn)品。

7. 可以進行無lvfnag操作，只是純度稍微降低，但不影響使用。

規(guī)格及成分：

運輸及保存：常溫運輸和保存，溶液 A 需要放 4℃長期保存，有效期一年。

自備試劑：lvfang

使用方法

下面的操作步驟是針對在1.5 mL 塑料離心管中進行的微量提取的，如果處理 樣品量大，請按比例增加各成份的用量并使用大的離心管和離心機。

1. 根據(jù)組織細胞類型的不同分為下面及種情況使用：

a) 對貼壁細胞：吸盡培養(yǎng)液，在每 10 平方厘米細胞中加入 1 mL柱式動物RNAout 溶液 A，用槍輕柔吹打數(shù)次，確保細胞全部裂解并且讓基因組DNA 充分斷裂。

b) 對懸浮細胞：離心收集細胞，吸盡液體，在每 1-5×106懸浮細胞中加入1 mL柱式動物 RNAout溶液A，用槍輕柔吹打數(shù)次，確保細胞全部裂解并且讓基因組 DNA 充分斷裂。如果是 fibroblasts 或 carcinoma cell，1 mL溶液A 的細胞使用量不要超過 1×106個細胞。

c) 對新鮮組織：先將剪切成小塊新鮮組織或液氮保存的組織放入 10 mL或15 mL 塑料離心管中，每 50-100 mg 組織加 1 mL 柱式動物 RNAout

溶液 A，用 Polytron 剪切式勻漿器勻漿30 秒左右。對肝、脾、胰、腎等細胞分裂十分旺盛的組織（細胞中含大量正在復(fù)制的 DNA），建議組織的使用量不要超過 50 mg/ mL 柱式動物 RNAout 溶液 A，否則十分容易產(chǎn)生 DNA污染。也可以用液氮研磨：在研缽中加入液氮，再加入50-100mg新鮮組織，然后研磨成粉后轉(zhuǎn)移到1.5mL 離心管中，再加入1mL 柱式動物 RNAout 溶液 A，震蕩30 秒混勻。

d) 對 RNALOCKER 保存組織：先用紙吸去 RNALOCKER 液體后再剪切成小塊，其余操作同新鮮組織的處理。

2. 如果進行無lvfang操作（所得 RNA純度稍低，但一般不影響后續(xù)使用），則將上步所得的細胞裂解物或勻漿液轉(zhuǎn)移至一個干凈的1.5 mL塑料離心管中，12,000 rpm 室溫離心 3-5 分鐘。

3. 如果進行帶lvfang操作（所得 RNA純度比免lvfang操作稍高），則將上步所得的細胞裂解物或勻漿液轉(zhuǎn)移至一個干凈的 1.5 mL 塑料離心管中，然后加入0.2倍體積的自備lvfang(1 mL柱式動物RNAout溶液A需0.2 mllvfang)，振蕩器上充分振蕩混均30 秒，12,000 rpm 室溫離心3-5 分鐘。

4. 將上清液轉(zhuǎn)移到一個干凈的 2 mL 塑料離心管中。注意：無lvfang操作時，

離心后管底是細胞碎片和結(jié)締組織纖維。帶lvfang操作時，離心后分上下層，下層有機相和上下層中間含有 DNA 和蛋白質(zhì)，吸取上清時避免觸及，否則將產(chǎn)生蛋白質(zhì)和 DNA污染。為保險起見，可以留下100 uL上清液不取。同時吸取上清時keyi緩慢進行。

5. 加入等體積的柱式動物 RNAout溶液 B，充分顛倒混勻。

6. 分次（一般需要 2-3 次）將加入柱式動物 RNAout 溶液 B 后的混合液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，12,000 rpm 室溫離心半分鐘，棄穿透液。如果溶液粘稠，可以延長離心時間到 2 分鐘。

7. 加 0.7 mL通用洗柱液到離心吸附柱中，12,000 rpm 室溫離心半分鐘，

棄收集管中的穿透液。一次洗滌一般足夠去除雜質(zhì)。

8. 再加0.3 mL 通用洗柱液到離心吸附柱中，12,000 rpm 室溫離心半分鐘，棄穿透液。此步可以省略。

9. 再室溫 12,000 rmp 干甩半分鐘。此步十分重要，否則殘留的通用洗柱液會影響 RNA的使用。

10. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到一自備的 RNase-free1.5mL 塑料離心管中，加入

50-100 uL RNA 洗脫液。

11. 室溫 12,000 rmp 離心半分鐘，離心管中溶液即為RNA 樣品，可以立即使用或存放于-80℃待用。

12. RNA 的電泳檢測：本試劑盒提取的 RNA keyi用甲醛變性膠電泳，如果在非變性的普通瓊脂糖膠（in TAE 或 TBE buffer）上電泳，一定要使用RNA 上樣液 RNAon（操作詳見 RNAon 使用手冊），千萬不要使用常用的 DNA上樣液，因為 DNA 上樣液沒有經(jīng)過去 RNase 處理，也不能將 RNA變性，得到的帶型將十分雜亂。

13. RNA 完整性的電泳檢測：如果需要做 Northern 雜交，強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行 RNA 電泳，因為非變性膠不能分離所有的 RNA 分子（BioTechniques，28：414，2000）。

14. RNA 產(chǎn)量產(chǎn)率測定：將5-10 μL RNA溶于TE緩沖液中(pH7.5-8.2 之

間)檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度（1 OD260

的 RNA=40 μg/mL），進而計算出RNA的產(chǎn)量（濃度X體積)和產(chǎn)率(RNA

產(chǎn)量/組織用量)。

15. RNA 純度測定：無污染的總 RNA的 OD260/OD280 一般在1.8-2.1 之間(具體數(shù)值與其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guān))，高于此范圍則分別表示樣品可能有蛋白質(zhì)污染，但一般不影響 RT-PCR 等反應(yīng)。

疑難解答

Q：上樣孔里的紅色熒光物一定是 DNA 污染嗎？ A：不是。用TAE 或TBE電泳液和非變性膠電泳 RNA 時容易產(chǎn)生此現(xiàn)象，天恩澤基因初步研究發(fā)現(xiàn)大部分紅色熒光物是變性不充分的單鏈RNA通過堿基互補或通過硼酸絡(luò)合（如果使用 TBE 作電泳液的話）形成的復(fù)合物，加RNase 處理后，這些紅色熒光物(RNA)一般會消失。為避免此現(xiàn)象，建議keyi使用甲醛變性膠電泳和 RNA上樣液(如天澤基因的 RNAon)。

Q：如何確認和去處除污染的基因組 DNA？

A：如果懷疑有 DNA 污染，可以用 RNase 處理 RNA 樣品，然后再電泳。如果上樣孔里的紅色熒光物不消失，則表示是基因組DNA 污染。進一步確認可以使用PCR擴增法。去除污染的 DNA 可以使用天澤基因的非酶的 DNA去除劑 DNA Erasol或 RNase-free DNase，由于RNase-free DNase 一般都有殘留的 RNase 污染，所以必須嚴格按照廠家提供的使用手冊進行操作

天恩澤柱式動物RNA提取試劑盒

關(guān)聯(lián)產(chǎn)品：柱式 DNA 清除劑（CAT#:90318）

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