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品牌: genelb 公司: 上海晶萊生物技術(shù)有限公司

提供商： 晶萊生物 服務(wù)名稱： 熒光定量PCR 規(guī)格： 熒光定量PCR

產(chǎn)品詳情請聯(lián)系金山科研平臺微信：jinshanbio
【晶萊生物】提供快捷高效的實時熒光定量PCR(Real Time PCR,RT PCR)服務(wù)，所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。是一個常用的mRNA水平的基因表達(dá)定量技術(shù)。服務(wù)內(nèi)容細(xì)胞/組織的基因差異表達(dá)檢測，經(jīng)過不同處理樣本之間特定基因的表達(dá)差異(如藥物處理、物理處理、化學(xué)處理等)，特定基因在不同時段的表達(dá)差異以及cDNA芯片或差顯結(jié)果的確證。組織/細(xì)胞樣品中基因拷貝數(shù)的確定，DNA或RNA的相對和絕對定量分析。包括病原微生物或病毒含量的檢測，轉(zhuǎn)基因動植物轉(zhuǎn)基因拷貝數(shù)的檢測，RNAi基因失活率的檢測等。基因分型，基因突變及多態(tài)性方面的研究。技術(shù)原理Real-time PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。利用熒光信號的變化實時檢測PCR擴(kuò)增反應(yīng)中每一個循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物量的變化，通過Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的分析對起始模板進(jìn)行定量分析。實時熒光定量PCR技術(shù)具有特異性強(qiáng)，有效解決了PCR污染問題、自動化程度高等特點，做到PCR每循環(huán)一次就收集一個數(shù)據(jù)，建立實時擴(kuò)增曲線，準(zhǔn)確地確定Ct值，從而根據(jù)Ct值確定起始DNA拷貝數(shù)，做到了真正意義上的DNA定量。技術(shù)流程一、RNA的提取二、DNase I 消化樣品RNA 中的DNA三、RNA瓊脂糖凝膠電泳四、RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNAReal-Time PCR引物設(shè)計的要求① Tm=55~65 ℃② GC=30~80%③ PCR擴(kuò)增產(chǎn)物長度：引物的產(chǎn)物大小不要太大，一般在80~300 bp之間都可。④ 引物的退火溫度要高，一般要在60 ℃以上。五、cDNA與引物質(zhì)量檢測選擇特異性好，擴(kuò)增效率高的引物作為實時熒光使用引物。六、利用相對定量的方法分析目的基因表達(dá)量的情況：常用的看家基因有β-actin，GAPDH，18S rRNA七、定量PCR檢測八、擴(kuò)增曲線和溶解曲線溶解曲線全部為單峰表明為特異性擴(kuò)增，熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段：熒光背景信號階段，熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。收費標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果：歡迎咨詢詳談，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。更多實驗技術(shù)服務(wù)請瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容，或來電咨詢！做實驗，找晶萊！您的科研生涯，我們一路相伴！【平臺項目開展范圍】慢病毒，腺病毒，RNAi類，分子生物實驗，病理實驗，免疫學(xué)實驗，細(xì)胞實驗，動物實驗，蛋白組學(xué)實驗，芯片類實驗，并為廣大客戶朋友們提供課題設(shè)計指導(dǎo)、基金申請指導(dǎo)、SCI、核心期刊等服務(wù)。全國統(tǒng)一咨詢服務(wù)熱線:4008-766-085【上海公司】上海市嘉定區(qū)槎溪路788弄1號17層【北京公司】北京市豐臺區(qū)政馨園一區(qū)2號樓1206室【長沙公司】長沙市高新區(qū)麓谷大道627號新長海中心B2-403室【技術(shù)咨詢】15801748762【公司郵箱】lab-china@genelb.cn【全國業(yè)務(wù)咨詢】北京：18810244671 上海：15800916241 長沙：15616228964 武漢：15201856307 西安：13651049420 廣州：18810244571 成都：18500539084 沈陽：15800620041 其他地區(qū)：13818286017【晶萊生物】已開展了數(shù)千個實驗外包項目。我們專注于醫(yī)學(xué)課題研究，已從課題申請、方案設(shè)計、試劑采購、模型構(gòu)造、標(biāo)本檢測、數(shù)據(jù)分析、以及對SCI撰寫與發(fā)表的支持，各個環(huán)節(jié)積累了數(shù)千個成功案例經(jīng)驗，為數(shù)千個來自臨床的科研工作者解決了大量的科研問題。更多相關(guān)實驗服務(wù)信息請咨詢晶萊生物