品牌: biomics 公司: 百奧邁科生物技術有限公司

貨號： BK2100 保存條件： 避光保存于-20℃ 供應商： Biomics Biotech 數量： 大量 英文名： EzOmicsTM One-Step qPCR Kit 保質期： 6個月以上 規格： 100T/200T/500T

規格： 100T 產品價格： ￥2000.0 規格： 200T 產品價格： ￥3800.0 規格： 500T 產品價格： ￥9000.0 產品詳情請聯系金山科研平臺微信：jinshanbio

試用產品：一步法實時熒光定量PCR檢測試劑盒（5次量）申領時間：2014.06.03-2014.06.22試用細則：1、活動針對學校、醫院、科研院終端客戶所在實驗室，每個實驗室只能申請一份試用裝2、參加過往期試用活動的客戶無法參加本次活動3、江浙滬地區優先4、本次活動郵費均有我公司承擔5、申請結束后，我們會統一審核申請信息，并與審核通過者電話聯系確認6、收到試用裝后1個月內提交優秀試用報告者，可申請8折購買本產品7、最終解釋權歸Biomics所有備注：1、試用報告模板可通過【該頁面最下方】或【管理中心-試用中心】下載（填寫之后發至toni@biomics.cn）2、若您是要檢測microRNA，需要準備microRNA特異引物，可配套我們的【miRNA特異引物試劑盒】使用3、掃描公司二維碼或搜索【Biomics-RNAi】，關注百奧邁科微信平臺，也可有機會獲得一步法實時熒光定量PCR檢測試劑盒試用裝（5次量）

可掃描二維碼：加微信咨詢。

EzOmics^TM 一步法實時熒光定量PCR 檢測試劑盒

貨號：BK2100產品包裝： 保存于-20℃

EzOmics^TM 一步法qPCR檢測試劑盒有100，200，500和2000次(50μl/反應) 四種不同規格的包裝。

試劑包裝規格描述100次反應200次反應500次反應2000次反應2×Master Mix1.25ml×21.25ml×41.25ml×101.25ml×402×mix包含反應緩沖液，SYBR Green I，反轉錄酶，熱啟動DNA聚合酶，RNase抑制劑，dNTPs，6mM MgCI₂， 穩定劑等等。DEPC-H₂O1.5ml×11.5ml×21.5ml×51.5ml×20DEPC處理無菌水，不含DNase和RNase。

產品說明：

EzOmics^TM 一步法實時定量PCR檢測試劑盒，采用一步反應法完成整個RT-qPCR過程，將RNA反轉錄成cDNA，cDNA模板qPCR定量放在同一反應體系中進行，反應過程無需增加額外的步驟。本試劑盒具有方便、簡捷、靈敏度高、重復性好的特點，即適用于SYBR Green I熒光染料法，同時也適用于熒光探針的檢測方法。此試劑盒適合市面上大多數現有的Real-time PCR儀器.反應條件及使用建議

反應混合體系配制建議：?一般建議至少配制比樣本多一個反應體系的混合體系(例如：如需要8個樣本，配制9個混合體系)。

建議添加無模板對照(Non-Template control，NTC) ，即添加DEPC-H2O 取代模板。

反轉錄

cDNA合成所需溫度，可以在37℃～45℃進行設置，根據模板和反轉錄引物，選擇特異性好，效率高的溫度。

熱啟動DNA聚合酶

EzOmics^TM 一步法qPCR檢測試劑盒中使用的是熱啟動Taq DNA聚合酶，在常溫條件下，酶的活性受到抑制。只有通過95°C反應10 min，激活熱啟動酶的活性，參與下一步qPCR反應。

MgCl2 濃度優化

MgCl2 是DNA聚合酶的一個復合因素。終濃度為3mM的MgCl2 濃度適用于大部分反應。然而，MgCl2的需求往往不盡相同，這取決于特殊的模板和引物。尤其是使用SYBR Green I熒光探針時，往往需要更高濃度的MgCl2。建議針對合適的模板，設計3個重復反應，按下表格給的MgCl2濃度梯度。下表為50μl體系中MgCl2達到各終濃度時的需要加入的量。

根據實驗結果，分析擴增效率、熔解曲線等，選擇最佳的MgCl2 濃度用于之后的相關qPCR的實驗。引物設計和濃度

大多數情況下，引物終濃度為200nM是能夠滿足PCR反應。不過，根據特殊的模板和引物，引物終濃度可以在25 ~ 900 nM范圍內進行優化。引物設計可借助于實時熒光定量PCR引物（探針）設計軟件（如：Beacon Designer）。為獲得最佳定量結果，產物大小最好控制在80 ~ 200bp的范圍內。

模板濃度

過量的模板會抑制反應的進行。通常情況下，每50μl反應體系中，總RNA含量在10ng～200ng是足夠的。當然特殊的基因會有所不同。

探針濃度

多數情況下，引物和探針的摩爾比控制在3:1比較合適。根據實際情況，探針的濃度可在10 ~ 250 nM范圍內進行優化。

熔解曲線分析

如果使用SYBR Green I染料法，建議在qPCR反應結束后進行熔解曲線分析，若儀器含有此功能。請參照儀器制造商推薦的使用方法說明。不含模板的陰性對照（NTC）用來確定反應過程中是否存在引物二聚體，含有模板的反應體系確定產物是否單一。注：可以跑瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR產物的特異性。實驗方法

SYBR Green I 染料法

熒光探針法

保存和穩定性試劑盒避光保存于-20°C。避免反復凍融。此儲存條件下，試劑可保存6個月以上。以下是我公司推出的microRNA檢測、實驗實驗優惠套餐1、microRNA 檢測實用優惠套餐：貨號BZ005 價格2650元

貨號產品名稱相關說明BK1010miRNA 特異引物試劑盒200T（贈送內參引物）高特異性，特殊設計BK2100miRNA熒光定量PCR檢測試劑盒100T進口分裝

2、microRNA實驗實用優惠套餐：優惠套餐一：貨號BZ001價格3298元

貨號產品名稱相關說明MIR001miRNA 化學合成（mimics，inhibitor，NC） 5nmol客戶提供miRNA名稱11668轉染試劑lipfection2000 100ulinvitrogenBK1010miRNA 特異引物試劑盒 200T根據客戶提供名稱BK2100miRNA熒光定量PCR檢測試劑盒100T進口分裝

優惠套餐二：BZ002 價格4898

貨號產品名稱相關說明MIR002miRNA 載體構建客戶提供miRNA名稱，免費提供載體11668轉染試劑lipfection2000 100ulinvitrogenBK1010miRNA 特異引物試劑盒 200T客戶提供名稱（贈送內參引物）BK2100miRNA熒光定量PCR檢測試劑盒100T進口分裝

溫馨提示：不可用于臨床治療。

資料下載：

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EzOmicsTM+miRNA+qPCR+Detection+Primer+Set（BK1010）.pdf 附件下載 (下載 30 次)

BK2100 EzOmics 一步法 qPCR 試劑盒-中文.pdf 附件下載 (下載 45 次)

qPCR檢測試劑盒試用報告模板.doc 附件下載 (下載 20 次)

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