TOROGreen?qPCR Master Mix(QST-100P)
高穩(wěn)定高GC染料法定量PCR Mix
目錄價(jià): ¥750.00
規(guī)格:1mL×5 tubes/bag
高穩(wěn)定高GC染料法定量PCR Mix
TOROGreen?qPCR Master Mix(QST-100P)
高特異性:高封閉Taq抗體和優(yōu)化的PCR緩沖液雙重作用大大降低了引物二聚體的產(chǎn)生。
室溫穩(wěn)定:在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過程中,性能不容易隨溫度變化而降低;完全室溫配制體系。
高GC擴(kuò)增:優(yōu)化的緩沖液配方可高效擴(kuò)增GC 含量高達(dá) 80% 的模板,從而簡(jiǎn)化引物設(shè)計(jì)。
寬線性范圍:可在8個(gè)模板梯度線性范圍內(nèi)展示很高的重復(fù)性。
1.高穩(wěn)定性驗(yàn)證
將 pET28a質(zhì)粒進(jìn)行 8 個(gè) 10 倍梯度稀釋作為模板,使用 37℃ 下保存一周的 QST-100 和 -20℃ 下保存的 QST-100 同時(shí)對(duì)稀釋好的模板進(jìn)行定量實(shí)驗(yàn),每孔加樣量 5 μL,擴(kuò)增曲線和標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖 1-a 和 1-b 所示:
圖1 高穩(wěn)定性驗(yàn)證
Fig.1 Validation of high stability
結(jié)果:從擴(kuò)增曲線中可以看到 37℃ 下保存一周的 QST-100 和 -20℃ 下保存的 QST-100 擴(kuò)增曲線一致,CT 值基本接近,從標(biāo)準(zhǔn)曲線中可以看到不同溫度下保存的試劑擴(kuò)增效率均在 95%-100%之間,R2值均為 0.999。
結(jié)論:QST-100 具有極高的穩(wěn)定性,同時(shí)具有卓越的擴(kuò)增效率,在寬廣的模板量區(qū)間內(nèi)具有優(yōu)秀的線性關(guān)系。
2.QST-100 與國(guó)產(chǎn) N 品牌特異性對(duì)比
將 pET28a質(zhì)粒進(jìn)行 8 個(gè) 10 倍梯度稀釋作為模板,使用 QST-100 和國(guó)產(chǎn) N 品牌按照各自說明書推薦的體系(模板加樣量相同),使用同一程序同時(shí)對(duì)稀釋好的模板進(jìn)行定量實(shí)驗(yàn),熔解曲線如下圖所示:
圖2 QST-100 與國(guó)產(chǎn) N 品牌特異性對(duì)比
Fig.2 Comparison of specificitybetween QST-100 and Brand N
結(jié)果:從熔解曲線中可以看到,QST-100在低濃度和高濃度模板下均為單一峰值,而在低濃度模板下,國(guó)產(chǎn) N 品牌出現(xiàn)了非特異性擴(kuò)增。
結(jié)論:QST-100 熔解曲線峰值單一,具有高特異性,符合 MIQE 要求。
3.QST-100 與進(jìn)口 T 品牌擴(kuò)增效率對(duì)比
將 pET28a質(zhì)粒進(jìn)行 5 個(gè) 10 倍梯度稀釋作為模板,使用 QST-100 和進(jìn)口 T 品牌按照各自說明書推薦的體系(模板加樣量相同),使用同一程序同時(shí)對(duì)稀釋好的模板進(jìn)行定量實(shí)驗(yàn),擴(kuò)增曲線和熔解曲線如圖 3-a 和 3-b 所示:
圖3 QST-100 與進(jìn)口 T 品牌擴(kuò)增效率對(duì)比
Fig.3 Comparison of amplification efficiency between QST-100 and Brand T
結(jié)果:從擴(kuò)增曲線中可以看到在同一模板濃度下,QST-100 比進(jìn)口 T 品牌起峰早,CT 值小。從熔解曲線中可以看到兩種試劑均沒有出現(xiàn)非特異性擴(kuò)增, 但QST-100 的 Tm 值低于進(jìn)口 T 品牌。
結(jié)論:在沒有非特異性擴(kuò)增產(chǎn)生的情況下,QST-100 擴(kuò)增效率高,且有利于高 GC 含量模板擴(kuò)增。
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