膜再生液-蛋白電泳/marker-蛋白與免疫
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膜再生液| 別名 | 一抗洗膜液；二抗洗膜液 |
|---|---|
| 英文名稱 | stripping buffer |
| 儲存條件 | 2-8°C |
產(chǎn)品簡介：
使用膜再生液可以對同一張膜進(jìn)行多次 Western Blot 檢測。在室溫條件下，將用過的膜浸泡在膜再生液 10-60 分鐘，可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后，可以使用不同的抗體進(jìn)行下一輪 Western Blot 實(shí)驗(yàn)。適宜從少量樣品多次檢測不同蛋白質(zhì)。即使樣品量并不匱乏，采用這一策略多次檢測同一 張膜上的蛋白，能省去給藥處理、蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等耗費(fèi)性步驟。而且可以消除重新上樣而帶來的誤差， 使可比性更強(qiáng)。 Western Blot
膜再生液特點(diǎn)是：
無毒無味無害，室溫下使用，室溫下保存；可對同一張膜進(jìn)行 5 次以上的 Western Blot 檢測。
適用：清除硝酸纖維素膜或 PVDF 膜上結(jié)合的抗體，不影響抗原蛋白。
使用方法：
1.將膜充分浸泡于適當(dāng)體積的再生液中，室溫洗脫10-20分鐘，時(shí)間長短應(yīng)該參考注意事項(xiàng)進(jìn)行優(yōu)化，洗脫某些抗體需較長時(shí)間，更有長達(dá)60分鐘之久，如果室溫洗脫效果不好，可將膜再生液加熱至50度，在50度水浴條件下進(jìn)行洗脫。
2. 取出膜，用洗滌液（如 TBST 等）漂洗兩次。
3. 此時(shí)膜上抗體已除去，可重新封閉后再加入另一種抗體進(jìn)行檢測。
注意事項(xiàng)： 1. 膜再生液實(shí)質(zhì)是在不影響膜上結(jié)合的抗原的條件下將抗體洗脫下來，實(shí)際操作中，膜類型、抗體類型、 濃度及抗原特性都影響洗脫難易度。
2. 適用于 ECL 和類似的化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的 Western 檢測。不適用于非化學(xué)發(fā)光試劑進(jìn)行的 Western 檢測，例如 DAB，NBT/BCIP。
3. 用 ECL 顯色后，再生液洗脫幾分鐘后，可再次加入 ECL 顯色液顯影，如膠片上顯示條帶，表明抗體 未除凈，須進(jìn)一步在再生液中浸泡，至膠片上無顯色。
4. 使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用 BSA 封閉的膜更容易再生。
5. 盡量避免讓膜干燥。
相關(guān)產(chǎn)品：
PR1800 Western blotting 蛋白 MARKER
PE0010 ECL Plus 熒光檢測試劑(ECL 超敏發(fā)光液)
A1010 30%丙烯酰胺 (29:1)
P1015 4×蛋白上樣緩沖液（含 DTT）
T1080 20×TBS
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