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4×蛋白上樣緩沖液(含DTT)-WesternBlot-蛋白與免疫

2023-10-29

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4×蛋白上樣緩沖液(含DTT)

英文名稱SDS-PAGE loading buffer,4×(with DTT)
儲存條件-20℃保存,建議分裝凍存,避免反復凍融,自發(fā)貨之日起至少 12 個月有效。
單位

產(chǎn)品簡介:

本產(chǎn)品適用于SDS-PAGE(SDS-變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時作蛋白質(zhì)上樣用。其主要成份為SDS,DTT,溴酚藍,緩沖鹽溶液等。SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復合物上帶有大量的負電荷,這時蛋白質(zhì)本身的電荷完全被SDS掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異;SDS還可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級和三級結(jié)構(gòu)。DTT可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。最終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關(guān)。溴酚藍用作電泳時的指示劑,可大概指示電泳結(jié)束的時間。

使用說明:

1、請按每30微升蛋白樣品加入10微升上樣緩沖液的比例(4倍稀釋)來使用。如果蛋白樣品濃度過高,可用雙蒸水稀釋。

2、混勻后,100℃水浴加熱5-10分鐘,使蛋白變性。

3、冷卻至室溫后,10000-14000rpm離心2-5分鐘,取上清直接上樣電泳即可。

注意事項:

1、聚丙烯酰胺凝膠濃度為8%時溴酚藍指示條帶的位置大概在30kd左右,膠濃度為12%時,約在20kd左右,膠濃度為15%時,大概在10kd。請根據(jù)自己目標條帶來判斷結(jié)果電泳時間。

2、本試劑因含DTT,有一定的毒性,為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

3、蛋白上樣緩沖液含有溴酚藍指示劑,PH值受保存溫度影響,在低溫凍存狀態(tài)下,溶液可能會呈現(xiàn)深棕色,不影響產(chǎn)品使用。

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