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4×蛋白上樣緩沖液(含巰基還原劑)-蛋白電泳/marker-蛋白與免疫

2023-10-29

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4×蛋白上樣緩沖液(含巰基還原劑)

英文名稱SDS-PAGE loading buffer,4×(with β-Mercaptoethanol)
儲存條件-20℃,有效期1年
外觀(性狀)藍(lán)色粘稠液體
單位

保存: -20℃,有效期一年。 產(chǎn)品簡介: 本產(chǎn)品適用于SDS-PAGE(SDS變性聚丙烯酰胺凝膠電泳)時作蛋白質(zhì)上樣用。其主要成份為SDS,β-巰基乙醇,溴酚藍(lán),緩沖鹽溶液等。 SDS可與蛋白質(zhì)結(jié)合使蛋白質(zhì)-SDS復(fù)合物上帶有大量的負(fù)電荷,這時蛋白質(zhì)本身的電荷完全被SDS掩蓋,消除了各種蛋白質(zhì)本身電荷的差異,SDS還可以斷開分子內(nèi)和分子間的氫鍵,破壞蛋白質(zhì)分子的二級和三級結(jié)構(gòu);β-巰基乙醇可以斷開半胱氨酸殘基之間的二硫鍵,破壞蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu),消除了蛋白結(jié)構(gòu)之間的差異。最終無電荷及結(jié)構(gòu)上差異的蛋白(亞單位),電泳速度只是與其分子量大小有關(guān);溴酚藍(lán)用作電泳時的指示劑,可大概指示電泳結(jié)束的時間。 使用說明: 1. 請按每30μL蛋白樣品加入10μL上樣緩沖液的比例(4倍稀釋)來使用。如果蛋白濃度過高,可用雙蒸水稀釋樣品。 2. 混勻后,100℃水浴加熱3-5分鐘,使蛋白變性。 3. 冷卻到室溫后,10000-14000rpm離心2-5分鐘,取上清直接上樣電泳即可。 注意事項: 1. 聚丙烯酰胺凝膠濃度為8%時溴酚藍(lán)指示條帶的位置大概在30kd左右;膠濃度12%時,約在20kd左右;膠濃度15%時,大概在10kd。請根據(jù)自己目標(biāo)條帶來判斷結(jié)果電泳時間。 2. 本試劑因含β-巰基乙醇,有一定的毒性,為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 3. 蛋白上樣緩沖液含有溴酚藍(lán)指示劑,PH值受保存溫度影響,在低溫凍存狀態(tài)下,溶液可能會呈現(xiàn)深棕色,不影響產(chǎn)品使用。

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