Westernblotting蛋白Marker-蛋白電泳/marker-蛋白與免疫
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Western blotting 蛋白Marker| 英文名稱 | Western Blotting Marker |
|---|---|
| 儲(chǔ)存條件 | -20℃可保存至少六個(gè)月。避免反復(fù)凍融，建議分裝保存。 |
| 單位 | 瓶 |
Western blotting 蛋白Marker產(chǎn)品簡(jiǎn)介 : Western Blot Marker是專門為Western Blot試驗(yàn)設(shè)計(jì)的分子量標(biāo)準(zhǔn)。傳統(tǒng)的Western Blot試驗(yàn)需要使用預(yù)染蛋白Marker來跟蹤檢測(cè)陽(yáng)性抗原信號(hào)和轉(zhuǎn)膜效率。但預(yù)染蛋白Marker用在Western Blot試驗(yàn)中有三大缺點(diǎn)：（1）預(yù)染蛋白Marker無法在膠片上曝光，曝光信號(hào)需要根據(jù)膜上的預(yù)染蛋白Marker來判斷，因此后續(xù)的圖片需要拼接才能兩者合而為一；（2）預(yù)染蛋白Marker都經(jīng)過化學(xué)修飾，經(jīng)過化學(xué)修飾的蛋白在SDS-PAGE電泳過程中遷移率發(fā)生改變，分子量信息不再準(zhǔn)確，往往導(dǎo)致Western Blot結(jié)果判斷出現(xiàn)較大偏差；（3）預(yù)染蛋白Marker無法檢測(cè)作為雜交過程的陽(yáng)性對(duì)照。Western Blot Marker由7種不同分子量的蛋白組成（19、20、35、45、60、65、110 KDa），其中19 、45 、65KDa條帶為藍(lán)色預(yù)染marker，其它四個(gè)條帶都可與人、小鼠、大鼠、山羊、綿羊、兔的IgG恒定區(qū)結(jié)合。Western Blot Marker可以直接結(jié)合二抗，或通過結(jié)合一抗間接結(jié)合二抗，因此蛋白Marker就能與抗原在同一張膠片上曝出信號(hào)，陽(yáng)性信號(hào)可以直接通過Western Blot Marker的位置來判斷。另外，預(yù)染發(fā)光Western BlotMarker 還可作為Western Blot 試驗(yàn)的陽(yáng)性對(duì)照。
使用說明: 1. 取出后于室溫放置融化； 2. 溫和地充分混勻，取 5μl 該 Western Blot Marker 至上樣孔中，進(jìn)行 SDS-PAGE 電泳。 3. 電泳完畢后轉(zhuǎn)至 PVDF 膜或 NC 膜，與一抗二抗孵育。 4. 孵育完畢，將 Western Blot Marker 與抗原一起通過 ECL 曝光至膠片。
Western blotting 蛋白Marker注意事項(xiàng) : 1. 本產(chǎn)品可直接使用，不需要加熱。 2. 及時(shí)更換電泳緩沖液并使用新配制的凝膠，以免影響電泳結(jié)果。 3. 該產(chǎn)品與抗血清或高濃度多克隆抗體一起孵育時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)非特異性條帶，此時(shí)可降低該預(yù)染發(fā)光Western Blot Marker 的上樣量至1~2μl。
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