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多聚-L-賴氨酸(7-15萬)-切片與免疫組化-蛋白與免疫

2023-10-29

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多聚- L- 賴氨酸(7- 15萬 )

有效期2年
級別10 mg/mL in water
別名聚-L-賴氨酸 氫溴酸鹽 多聚賴氨酸
英文名稱Poly-L-lysine hydrobromide
CAS25988-63-0
分子量70,000-150,000
儲存條件-20℃
外觀(性狀)白色纖維狀固體
單位

多聚賴氨酸可以用于促進細胞的貼壁生長。

原理: 多聚賴氨酸溶液是廣泛應(yīng)用的組織切片與玻片黏合劑,該多聚陽離子分子與組織切片上的陰離子相互作用會產(chǎn)生較強的黏合力。培養(yǎng)瓶表面的性質(zhì)對于細胞培養(yǎng)至關(guān)重要,細胞表面的糖蛋白(陰性)易于吸附在親水性的表面上,因而細胞培養(yǎng)表面如果有相當(dāng)含量的陽性電荷更能促進細胞吸附,這正是運用多聚賴氨酸優(yōu)化細胞培養(yǎng)表面的重要所在。 應(yīng)用: 適用組織學(xué),免疫組織化學(xué),冰凍切片,細胞涂片,原位雜交等使用的玻片的防脫片處理,以防實驗操作過程中組織掉片。也可用于細胞培養(yǎng),增加細胞貼壁能力。 溶液配制: 用去離子水溶解,配制成母液備用。保存于-20℃。 玻片處理: 1. 滅菌水稀釋聚賴氨酸溶液,一般的使用濃度為0.01%。 2. 將玻片浸在稀釋的多聚賴氨酸溶液5分鐘。注意增加時間不會提高包被效果。 3. 在60℃烘箱1小時干燥,或室溫18-26℃過夜干燥待用。 注意: 1. 每100mL已稀釋的多聚賴氨酸溶液要包被的玻片40-90張, 超過90張片子將影響其黏合力。 2. 用之前的玻片必須保持清潔。必要時用含1% HCl的70%乙醇溶液來清洗。 3. 釋過的多聚賴氨酸溶液要放在2-8℃,至少在3個月內(nèi)是穩(wěn)定的。 4. 用過的稀釋液要過濾,若出現(xiàn)渾濁或長菌要丟棄 5. 多聚賴氨酸濃度可以高一些,吸出來的可以重復(fù)利用至少20次。 培養(yǎng)瓶處理: 1. 包被培養(yǎng)板或者是培養(yǎng)瓶,一般多聚賴氨酸濃度為0.01%, 2. 準備100ml三蒸水,經(jīng)高壓滅菌處理。 3. 0.01%的多聚賴氨酸以50微升每平方厘米的量均勻涂于培養(yǎng)底物的表面,室溫下靜置5min,吸除多余液體。 4. 加入滅菌水,反復(fù)沖洗三次,無菌操作。 5. 處理后無菌晾干備用。 6. 回收后保持無菌的多聚賴氨酸可反復(fù)利用。

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