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產(chǎn)品說(shuō)明:

The TRIzol? Max™ Bacterial RNA Isolation Kit contains TRIzol? Reagent and Max Bacterial Enhancement Reagent. Store at 2°C to 8°C.

TRIzol? 試劑是一種完全的即用型試劑，可用于提取高質(zhì)量的總RNA或者從各種生物樣本中同時(shí)提取RNA、DNA和蛋白質(zhì)。這種酚和異硫氰酸胍單相溶液，可用于提取人、動(dòng)物、植物、酵母或細(xì)菌來(lái)源的細(xì)胞和組織樣本中的純RNA、DNA和蛋白質(zhì)，只需一個(gè)小時(shí)即可完成。 ? 從一份樣品同時(shí)提取RNA、DNA和蛋白質(zhì) ? 即便是難以處理的樣本類型，亦具有出色的裂解能力 ? 優(yōu)化的配方和實(shí)驗(yàn)方案，適用于組織、細(xì)胞、血清、病毒和細(xì)菌等多種樣品類型 從多種樣本體積和來(lái)源獲得可靠的純化RNA TRIzol? 試劑用于處理人、動(dòng)物、植物或細(xì)菌來(lái)源的少量組織 (50-100 mg) 和細(xì)胞 (5 ?— 106)，以及大量組織 (≥1 g) 和細(xì)胞 (>107)，均可獲得極佳的性能，且附帶樣本純化實(shí)驗(yàn)方案。在TRIzol? 試劑進(jìn)行樣本勻漿化的過(guò)程中，它可以破壞細(xì)胞，溶解細(xì)胞組分，同時(shí)高效的抑制RNA酶的活性，從而維持RNA的完整性。TRIzol? 試劑方法十分簡(jiǎn)單，可同時(shí)處理大量樣本。整個(gè)過(guò)程可在一小時(shí)內(nèi)完成。采用TRIzol? 試劑提取的總RNA不會(huì)被蛋白質(zhì)和DNA污染。 適用于多個(gè)分子靶點(diǎn)的提取 TRIzol? 試劑使您可以順序沉淀單一樣本中的RNA、DNA和蛋白質(zhì)。采用TRIzol? 試劑進(jìn)行樣本勻漿化后，加入氯仿，勻漿物可分成透明的上層水相層 (含有RNA)、相界面和紅色的下層有機(jī)層 (含有DNA 和蛋白質(zhì))。然后用異丙醇從水相層中沉淀出RNA。用乙醇從相界面/有機(jī)層中沉淀出DNA。利用異丙醇沉淀從酚-乙醇上清液中沉淀出蛋白質(zhì)。洗滌沉淀的RNA、DNA或蛋白質(zhì)，去除雜質(zhì)，重懸浮后供下游應(yīng)用。 僅供研究使用。不得用于動(dòng)物或人類的診斷或治療。

性能描述：

TRIzol試劑（美國(guó)專利號(hào)，5346994）是即用型細(xì)胞或組織總RNA提取試劑。該試劑是利用苯酚和異硫氰酸胍一步完成提取RNA的方法，是對(duì)Chomczynski和Sacchi開(kāi)發(fā)的單步RNA提取法的改善。在勻質(zhì)化或裂解樣品中，TRIzol試劑可保持RNA的完整性，同時(shí)能破壞細(xì)胞并溶解細(xì)胞成分。加入氯仿離心后，溶液分離成水相和有機(jī)相。 僅RNA存在于水相中。將水相轉(zhuǎn)移后，RNA通過(guò)異丙醇沉淀回收。移去水相后，樣品中DNA和蛋白質(zhì)可通過(guò)相繼沉淀回收。用乙醇沉淀可從中間相得到DNA，加入異丙醇沉淀可從有機(jī)相得到蛋白質(zhì)。 此技術(shù)既可良好的應(yīng)用于少量組織（50-100mg）和細(xì)胞（5×106），也可用于大量的組織（≥1 g）和細(xì)胞（>107）的處理，組織和細(xì)胞不限于人、動(dòng)物、植物或細(xì)菌。TRIzol試劑使用簡(jiǎn)單方便，可同時(shí)處理大量樣本。整個(gè)過(guò)程可在一小時(shí)內(nèi)完成。用TRIZOL提取總RNA可避免蛋白質(zhì)和DNA污染。提取的RNA可用于Northern blot分析、斑點(diǎn)雜交、poly（A）+選擇、體外翻譯、RNA酶保護(hù)分析和分子克隆。 TRIzol試劑方便提取不同種類、不同分子大小的RNA。例如，從大鼠肝中提取RNA，經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳和溴化乙錠染色，高分子量RNA離散帶長(zhǎng)度可高達(dá)7 kb和15 kb，(組成mRNA’s和hnRNA’s)，兩個(gè)主要的核糖體RNA帶在~5 kB（28 S）和~2 Kb（18 S）。低分子量RNA介于0.1和0.3 kB之間（tRNA，5S）。分離出的RNA用TE稀釋，其A260/A280比值≥1.8。 防止RNA酶污染的注意事項(xiàng) 在不當(dāng)?shù)募夹g(shù)操作過(guò)程中，RNA酶可在任何提取程序中意外引入RNA的制備中。由于酶的活性難以抑制，所以必須防止其引入。進(jìn)行RNA工作時(shí)，下列準(zhǔn)則應(yīng)予以遵守。 ①一直戴著手套。皮膚上通常包含的細(xì)菌和霉菌，可污染RNA的制備，同時(shí)也是RNA酶的一個(gè)來(lái)源。良好的微生物操作技術(shù)可防止微生物污染。 ②使用無(wú)菌制品，專為RNA工作準(zhǔn)備的一次性塑料器皿和自動(dòng)吸管避免與共用設(shè)備的RNA酶交叉污染。例如，一個(gè)實(shí)驗(yàn)室正在使用的RNA探針可能用得上RNA酶A或RNA酶T1以減少過(guò)濾背景，其中任何非一次性物品（如自動(dòng)吸管）可能是大量RNA酶的來(lái)源。 ③TRIzol試劑可保護(hù)RNA酶對(duì)RNA的污染。下游樣品處理要求非一次性的玻璃器皿或塑料器皿無(wú)RNA酶。玻璃物品可以在150 ℃烘烤4小時(shí)，塑料制品，可浸泡10分鐘的0.5 M NaOH溶液，然后用清水徹底沖洗，并高壓蒸汽滅菌。 其他需要注意的事項(xiàng)： ①用小于2毫升體積的TRIZOL試劑工作時(shí)，建議使用一次性透明聚丙烯管。 ②對(duì)于較大的體積，用玻璃（Corex）或聚丙烯管，并測(cè)試以確保該管裝滿TRIzol試劑和氯仿時(shí)可承受12,000×g的離心力，不要使用泄漏或有裂紋的管子。 ③離心前平衡管子的重量 ④ 玻璃管必須用封口膜密封，密封時(shí)封口膜要覆蓋有螺絲處，聚丙烯管離心前必須蓋好。

警告：本品與皮膚接觸及吞咽有毒。可導(dǎo)致燒傷。與皮膚接觸后，應(yīng)立即用洗滌劑和大量清水沖洗。如感到身體不適，應(yīng)就醫(yī)（如需要，請(qǐng)出示本產(chǎn)品標(biāo)簽）。本產(chǎn)品含有苯酚和其他成分。已經(jīng)證明TRIzol 在室溫下可穩(wěn)定保存12個(gè)月。但我們建議在儲(chǔ)存于2-8°C，以保證最佳性能。

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