X-α-galα-半乳糖苷酶顯色底物-重組克隆表達-分子生物學(xué)
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| 有效期 | 3年 |
|---|---|
| 溶解性 | 5mg/mL in DMF |
| 別名 | 5-溴-4-氯-3-吲哚-a-D-半乳糖苷 |
| 英文名稱 | X-a-gal |
| CAS | 107021-38-5 |
| 分子式 | C14H15BrClNO6 |
| 分子量 | 408.63 |
| 儲存條件 | -20℃ |
| 純度 | 95% |
| 外觀（性狀） | 白色或灰白色結(jié)晶粉末，或者無色結(jié)晶 |
| 單位 | 瓶 |
產(chǎn)品信息： X-α-Gal是一種酵母半乳糖苷酶 (MEL1) 的顯色底物，用于在培養(yǎng)基上直接檢測GAL4系統(tǒng)的酵母雙雜交作用。通過藍白顏色篩選，快速和簡便地識別陽性的藍色克隆，無需費時的β-半乳糖苷酶報告基因檢測。 X-α-Gal檢測酵母MEL1基因的激活，MEL1是GAL4酵母雙雜交系統(tǒng)的一個報告基因，編碼分泌型的α-半乳糖苷酶。該酶可水解無色的X-α-Gal底物并最終產(chǎn)生藍色產(chǎn)物。表達α-半乳糖苷酶的酵母菌落在含有X-α-Gal的培養(yǎng)基上顯藍色，即陽性的雙雜交作用。 x-α-gal a-半乳糖苷酶顯色底物用途： （1）α-半乳糖苷酶的顯色底物，形成藍色沉淀。在培養(yǎng)基上直接檢測酵母雙雜交相互作用，利用此底物可以省去雙雜交體系中的β-半乳糖苷酶溶液和filter-lift assays； （2）用于區(qū)分腸桿菌科內(nèi)的不同菌種以及區(qū)分雙歧桿菌和乳酸菌； （3）在組織化學(xué)中用于酶活性的檢測； x-α-gal a-半乳糖苷酶顯色底物 儲存液的配制及使用步驟： A）涂布于預(yù)制平板：溶解24mg X-α-gal于6 mL DMF，終濃度為4mg/ mL的溶液。 ①涂布200ul(15cm) 或者100ul（10cm）X-α-gal 儲存液于預(yù)制平板上； ②放于37℃培養(yǎng)箱至液體被吸收（由于DMF揮發(fā)性低，最長可放4小時）； ③將轉(zhuǎn)化細菌或酵母涂于平板上，于37℃或30℃培養(yǎng)直至藍色菌落出現(xiàn)。 B）直接加入瓊脂中：溶解60mg X-α-gal于3 mL DMF，終濃度為20mg/ mL的溶液。 ①將已滅菌瓊脂培養(yǎng)基冷卻至50-55 ℃； ②往已冷卻的培養(yǎng)基中直接加入2 ml -10 ml 20 mg/ ml X-α-Gal儲存液，混勻，快速倒平板。 外觀：白色或灰白色結(jié)晶粉末，或者無色結(jié)晶； 溶解度（1%甲醇溶液）：無色，清澈； 儲存：-15°C避光避潮保存；
x-α-gal α-半乳糖苷酶顯色底物
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