HotStartTaqDNAPolymerase-核酸提取/純化-分子生物學(xué)
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| 別名 | 熱啟動(dòng)酶 熱啟動(dòng)DNA聚合酶 熱啟動(dòng)Taq DNA聚合酶 |
|---|---|
| 儲存條件 | -20℃保存, 有效期至少一年 |
Hot Start Taq DNA Polymerase品是抗Taq單克隆抗體修飾的熱啟動(dòng)Taq DNA Polymerase，高溫加熱前抗Taq單克隆抗體與 Taq酶結(jié)合，抑制聚合酶的活性，從而抑制低溫條件下由引物的非特異性退火或引物二聚體引起的非特異性擴(kuò)增。抗Taq單克隆抗體在PCR反應(yīng)最初的DNA變性步驟已變性，因此無需特殊失活處理，在常規(guī)PCR反應(yīng)條件下即可使用。在qPCR反應(yīng)中，能明顯提高熒光PCR的擴(kuò)增效率（尤其對低拷貝數(shù)模板），改善其擴(kuò)增曲線的完美度，其穩(wěn)定性好、可重復(fù)性高、特異性強(qiáng)。此酶室溫放置一周，酶活性仍可保持95%以上。 活性定義：1單位(U) Taq DNA Polymerase活力定義為在74℃，30分鐘內(nèi)，以活性化的大馬哈魚精子DNA作為模板，將10 nmol脫氧核苷酸摻入到酸不溶物質(zhì)所需的酶量。 質(zhì)量控制： SDS-PAGE檢測Taq DNA Polymerase純度大于99%；經(jīng)檢測無外源核酸酶活性；PCR方法檢測無宿主殘余DNA；能有效地?cái)U(kuò)增人類基因組中的單拷貝基因；室溫存放一周，無明顯活性改變。 酶貯存緩沖液： 20mM Tris-HCl (pH 8.0); 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 100 mM KCl ; 50% glycerol; 穩(wěn)定劑 適用范圍： 用于小于6kb的對保真度要求不高的DNA片段的PCR擴(kuò)增、DNA標(biāo)記、引物延伸、序列測定、平末端加A等，產(chǎn)物可以直接用于T/A載體克隆。 建議PCR條件：預(yù)變性溫度是95度，時(shí)間為5-10分鐘，其它的和普通Taq酶的反應(yīng)條件一樣。
PCR體系（以50μl反應(yīng)體系為例）
Template <0.5μg
上游引物（10μM） 1μl
下游引物（10μM） 1μl
10×Buffer（含Mg2+） 5μl
dNTP（各2.5mM） 4μl
熱啟動(dòng)Taq酶 0.5-1μl
ddH2O up to 50μl
相關(guān)產(chǎn)品： PC1120 2×Taq PCR MasterMix (含染料） PC1300 Pfu DNA Polymerase PC2200 dNTPs Mix(10mM each) D1020 10×DNA上樣緩沖液 T1060 50×TAE 緩沖液 G8142 GoldView II型核酸染色劑(5000×)
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