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Monarch基因組DNA提取試劑盒貨號(hào)#T3010LNEB酶試劑NewEnglandBiolabs

2023-09-24

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產(chǎn)品資料 – 核酸純化 – 基因組DNA提取Monarch基因組 DNA提取試劑盒 收藏

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#T3010L150 preps4,839.00 無無無無有

#T3010S50 preps1,879.00 無有無無無

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特性從多種樣本(細(xì)胞、血液、組織和其他)中提取高質(zhì)量gDNA極低的 RNA 殘留(通常< 1%)提取的 gDNA 片段更長(zhǎng)(最高峰值≥50kb)操作便捷友好,提取快速,裂解充分試劑盒可以純化基因組DNA試劑盒組分可以單獨(dú)購(gòu)買 Monarch基因組 DNA 提取試劑盒是NGS實(shí)驗(yàn)中NEBNext建庫(kù)產(chǎn)品的完美補(bǔ)充。提取的長(zhǎng)片段DNA,是長(zhǎng)讀長(zhǎng)測(cè)序平臺(tái)的上游純化的首選。

概述

Monarch基因組 DNA 提取試劑盒是NGS實(shí)驗(yàn)中NEBNext建庫(kù)產(chǎn)品的完美補(bǔ)充。提取的長(zhǎng)片段DNA,是長(zhǎng)讀長(zhǎng)測(cè)序平臺(tái)的上游純化的首選。

Monarch 基因組 DNA(gDNA)提取純化試劑盒集細(xì)胞裂解、RNA 去除和完整 DNA 純化為一體,可用于多種生物樣品如培養(yǎng)細(xì)胞、血液和哺乳動(dòng)物組織。對(duì)難裂解的樣品如細(xì)菌和酵母,試劑盒提供加強(qiáng)裂解步驟,以獲得裂解充分的樣品。說明書中還詳述了臨床樣品如唾液和頰粘膜拭子的 gDNA提取過程,對(duì)于已經(jīng)提取的 gDNA樣品,說明書同樣詳述了快速純化步驟。提取的 gDNA具有最高質(zhì)量,通常A260/280>1.8、A260/230>2.0、高DIN 分值和極低殘留 RNA。本試劑盒提取的 gDNA適用于終點(diǎn) PCR、qPCR 和NGS 文庫(kù)制備等多種下游應(yīng)用。 峰值片段大小一般是50-70kb,特別適用于長(zhǎng)讀長(zhǎng)測(cè)序平臺(tái)。

組分Monarch基因組 DNA提取試劑盒組分-Monarch 基因組 DNA 純化柱-Monarch 收集管II-Monarch基因組 DNA 組織裂解緩沖液-Monarch基因組 DNA 細(xì)胞裂解緩沖液-Monarch基因組 DNA 血液裂解緩沖液-Monarch基因組 DNA 結(jié)合緩沖液-Monarch 基因組 DNA 洗滌緩沖液-Monarch 基因組 DNA 洗脫緩沖液-Monarch RNase A-蛋白酶 K,分子生物學(xué)級(jí)Monarch 基因組 DNA 提取試劑盒可以從多種樣本中高效提取高質(zhì)量、高分子量的基因組DNA。每個(gè)樣本各取100 ng基因組DNA,用0.75%瓊脂糖膠電泳上樣。血液、培養(yǎng)的細(xì)胞和組織用標(biāo)準(zhǔn)說明書,頰粘膜拭子、唾液、革蘭氏陰性菌和陽(yáng)性菌用補(bǔ)充說明書進(jìn)行提取。起始材料:1X106Hela 細(xì)胞、100 μl人類血液、10 μl鳥類血液、10 mg冷凍組織粉末、1個(gè)頰粘膜拭子、500 μl唾液和~ 1X109 細(xì)菌細(xì)胞。使用Lambda DNA-Hind III digest (NEB #N3012)作為 marker 上樣于最后一條泳道。提取出的 gDNA 樣本用Genomic DNA ScreenTape® ,在 Agilent Technologies® 4200 TapeStation® 上進(jìn)行分析。樣本通常產(chǎn)量峰值在 50-70 Kb之間,DINs在9左右。在準(zhǔn)備頰粘膜拭子和唾液的過程中,不可避免會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞破損,這會(huì)導(dǎo)致形成彌散狀的低分子量凋亡條帶。

Monarch基因組 DNA提取試劑盒提取出的高質(zhì)量基因組DNA適用于長(zhǎng)片段PCR 和 qPCR 等靈敏下游實(shí)驗(yàn)。

A:每個(gè)樣本用 25ng 人DNA作為模板,用 LongAmp® Hot Start Taq 2X Master Mix(NEB #M0533)和特異引物分別擴(kuò)增出6、8、10、12 、16 、20 kb的擴(kuò)增子產(chǎn)物。PCR反應(yīng)在Applied Biosystems® 2720 熱循環(huán)儀中進(jìn)行。Hela細(xì)胞 DNA 和人源血液基因組 DNA 用 Monarch試劑盒提取,與商業(yè)化的人源細(xì)胞系 NA19240 F11 參照 DNA 進(jìn)行比較。分別取 10 ul上樣于1.5%的瓊脂糖膠,用 1 kb DNA Ladder(NEB #N3232)作為 Marker。膠圖結(jié)果顯示DNA高度完整,非常適合長(zhǎng)片段PCR。B:從人全血、Hela細(xì)胞和小鼠鼠尾用Monarch試劑盒提取基因組 DNA,10 倍系列稀釋 5 次作為起始 DNA 模板濃度。在Bio-Rad® CFX Touch qPCR thermal cycler儀器中,用Luna® 通用 qpcr預(yù)混液(NEB#M3003) 和 特異引物對(duì)gHEME(人類全血)和gREL(Hela,小鼠鼠尾)進(jìn)行PCR檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示 DNA 具有高純度,不含抑制劑,非常適合qPCR。

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