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　　原理

　　為獲得準(zhǔn)確的real-time RT-PCR基因表達分析結(jié)果，很重要的是僅擴增和檢測cDNA。基因組DNA的干擾可通過設(shè)計橫跨外顯子/外顯子邊界的引物或探針避免。盡管如此，在某些特殊情況下(如：cDNA來自一個單外顯子基因)，起始RNA樣品必須無基因組DNA。

　　使用QuantiTect Reverse Transcription Kit，基因組DNA污染物可使用*的gDNA去除緩沖液迅速有效的去除。因為純化RNA樣品后無需另外采用DNA酶消化，從而可節(jié)省時間和費用。并且也無需設(shè)計RNA特異性引物和探針。

　　應(yīng)用

　　QuantiTect Reverse Transcription Kit可從各種類型的起始樣品中合成cDNA以實現(xiàn)高效和高靈敏度的real-time RT-PCR，包括激光顯微切割樣品和活組織切片樣品。與其他供應(yīng)商提供的試劑相比，QuantiTect Reverse Transcription Kit在檢測低豐度基因時具有更高的靈敏度(見圖：“Real-Time，兩步法RT-PCR精確度更高”)。

　　為獲得高特異性和高靈敏度的real-time RT-PCR結(jié)果，又避免耗時的反應(yīng)步驟優(yōu)化過程，我們推薦QuantiTect Reverse Transcription Kit和其他QuantiTect產(chǎn)品聯(lián)合使用。包括經(jīng)優(yōu)化的PCR反應(yīng)預(yù)混液和即用型引物，使用SYBR Green染料法或序列特異性探針法進行 real-time RT-PCR。