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GIBCO(life）G418 GENETICIN抗生素

英文描述：Geneticin® Selective Antibiotic (G418 Sulfate), Powder

晶體、未消毒（G418 硫酸鹽）

穩(wěn)定性：非常穩(wěn)定，可以粉末形式在室溫下 (15°C 至 30°C) 保存zui多 3 年；可溶于水。

GIBCO(life）G418 GENETICIN抗生素

GIBCO(life）G418 GENETICIN抗生素

G418（G-418即G-418 sulfate，也稱Geneticin，分子式為C20H40N4O10.2H2SO4，分子量為692.71 g/mole）是一種氨基糖類抗生素，其結(jié)構(gòu)與新霉素、慶大霉素、卡那霉素相似，它通過影響80S核糖體功能而阻斷蛋白質(zhì)合成,對原核和真核等細(xì)胞都有毒性 ,包括細(xì)菌、酵母、植物和哺乳動物細(xì)胞 ,也包括原生動物和蠕蟲。是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染zui常用的選擇試劑。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞基因組合適的地方后 ,則能啟動neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá) ,使細(xì)胞獲得抗性而能在含有Ｇ418的選擇性培養(yǎng)基中生長。Ｇ418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動物等方面得以廣泛應(yīng)用。

G418和篩選

篩選之前由于每種細(xì)胞對G418的敏感性不同，而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同，所以在篩選之前，一定要確定G418的zuijia篩選濃度。具體如下：將細(xì)胞稀釋到1000個細(xì)胞/mL，在100ug/mL~1mg/mL的G418濃度范圍內(nèi)進(jìn)行篩選，選擇出在10~14天內(nèi)使細(xì)胞全部死亡的zui低G418濃度來進(jìn)行下一步的篩選試驗(yàn)。

由于每種細(xì)胞對G418的敏感性不同，一般變動在100ug/ml～1000ug/ml范圍。而且不同的廠家生產(chǎn)的相同濃度的G418的活性不盡相同，所以在篩選之前，一定要確定你的細(xì)胞對這一批G418的篩選濃度。盡管如此，特性明確的細(xì)胞系G418的zuijia用量還是穩(wěn)定的。《分子克隆》給出了幾個常用細(xì)胞系所需G418的zuijia用量 ：