qiagen 12145質(zhì)粒提取試劑盒Plasmid Midi Kit
轉(zhuǎn)染效率與質(zhì)粒純化方法。
采用不同方法制備pRSVcat DNA，通過脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染將其導(dǎo)入的細(xì)胞系內(nèi)，40小時后測定CAT表達(dá)水平，確定轉(zhuǎn)染效率。每個柱形代表4個獨立的轉(zhuǎn)錄的平均值（2個質(zhì)粒制備物分別轉(zhuǎn)染2次）。使用QIAGEN Plasmid Kit可獲得zui高的轉(zhuǎn)染效率。
qiagen 12145質(zhì)粒提取試劑盒Plasmid Midi Kit
Performance
QIAGEN Plasmid Kit利用重力流QIAGEN陰離子交換柱技術(shù)高效純化質(zhì)粒DNA。產(chǎn)量可達(dá)10 mg（Giga）、2.5 mg（Mega）、500 µg（Maxi）、或100 µg（Midi）高拷貝質(zhì)粒DNA（培養(yǎng)體積取決于質(zhì)粒拷貝數(shù)、插入片段大小、宿主菌株和培養(yǎng)基。）QIAGEN Plasmid Kits純化的質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用，如：轉(zhuǎn)染（參見"Transfection efficiency versus plasmid purification method"）、克隆和體外轉(zhuǎn)錄。
Principle
QIAGEN-tips內(nèi)*的陰離子交換樹脂專為純化核酸設(shè)計。它*的分離特性，使純化的DNA的純度相當(dāng)于連續(xù)2次CsCl梯度離心得到的DNA純度。預(yù)裝的QIAGEN-tips利用重力流原理工作，縮短了純化質(zhì)粒的手動操作時間。整套QIAGEN質(zhì)粒純化體系避免苯酚、lvfang、溴化乙錠和CsCl等有毒物質(zhì)，減小對使用者和環(huán)境的危害。
Procedure
使用QIAGEN Plasmid Kits，細(xì)菌裂解物通過離心澄清。澄清后的裂解物上樣到陰離子交換柱，質(zhì)粒DNA在適當(dāng)?shù)牡望}條件和pH條件下與樹脂進(jìn)行選擇性結(jié)合。RNA、蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物和和其它低分子量雜質(zhì)用中鹽洗滌液去除，用高鹽緩沖液洗脫純質(zhì)粒DNA（參見"QIAGEN Plasmid Kit procedures"）。得到的DNA用異丙醇沉淀濃縮和脫鹽后，離心收集。
Applications
QIAGEN Plasmid Kits純化質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用，如：
轉(zhuǎn)染
克隆
PCR
體外轉(zhuǎn)錄
| 應(yīng)用 | Transfection, cloning, sequencing, capillary sequencing etc. |
| 起始樣本體積 | 2.5–5 liters culture volume |
| 質(zhì)粒類型 | High-copy, low-copy, cosmid DNA |
| 處理 | Manual (centrifugation) |
| 每次處理樣本量；通量 | 1 sample per run |
| 技術(shù) | Anion-exchange technology |
| 每次運行時間或處理樣本數(shù) | 320 min |
| 產(chǎn)量 | <10 mg |
訂購信息：
| QIAGEN Plasmid Midi Kit (25) | 3120 | 12143 | 25次 |
| QIAGEN Plasmid Midi Kit (100) | 11510 | 12145 | 100從 |
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