QIAGEN試劑盒miRNeasy Micro Kit (50)
用于從少量細(xì)胞核組織中純化miRNA和總RNA
從小樣本中有效純化miRNA和總RNA
高純度RNA,適用于多種下游應(yīng)用
簡(jiǎn)單、靈敏的操作流程
自動(dòng)化實(shí)驗(yàn)方案
miRNeasy Micro Kit用于從少量培養(yǎng)細(xì)胞、分選細(xì)胞、冰凍切片激光捕獲顯微切割(LCM)樣本和動(dòng)物及人體組織中純化RNA,包括miRNA和其他小RNA分子。
從較少量的細(xì)胞中可靠回收miRNA。
使用miRNeasy Micro Kit從10倍梯度稀釋的Jurkat細(xì)胞(106至10個(gè)細(xì)胞)中純化總RNA。[A] 采用手動(dòng)方法或 [B] 使用QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀,從各洗脫液中純化RNA,重復(fù)兩次。在Rotor-Gene Q實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析儀上,使用miScript PCR System及純化的RNA檢測(cè)miR-16。在低至10個(gè)細(xì)胞中亦可檢測(cè)出miR-16,并獲得一致且可重復(fù)的CT值。陰性對(duì)照中未檢測(cè)到信號(hào)(藍(lán)色和黃色曲線)。
QIAGEN試劑盒miRNeasy Micro Kit (50)
miRNeasy實(shí)驗(yàn)流程。
性能miRNeasy Micro Kit可有效純化來自少量組織和細(xì)胞樣本的RNA。可純化多種組織和細(xì)胞的RNA,包括難裂解組織。miRNeasy Kits制備的RNA純度高,可直接用于敏感的下游應(yīng)用。miRNeasy操作流程將鹽或ben fen污染的可能性降到zui低,這些污染可能影響后續(xù)分析。與其他miRNA純化(如使用ben fen抽提和沉淀)相比,miRNeasy Micro Kit除了純度更高以外,還能獲得更高產(chǎn)量。原理
miRNeasy Micro Kit可從少量培養(yǎng)細(xì)胞(至多1 x 106 個(gè)細(xì)胞)和多種動(dòng)物及人體組織(至多5mg組織)中純化總RNA,包括miRNA和其他小RNA分子。試劑盒整合了基于ben fen/胍的樣本裂解方法和基于硅膠膜的總RNA純化方法。
試劑盒中包括的QIAzol Lysis Reagent是ben fen和異硫氰酸胍的單相溶液,便于裂解組織,抑制RNases,并去除大部分有機(jī)抽提裂解液中的胞內(nèi)DNA和蛋白。樣本在QIAzol Lysis Reagent中勻漿后,加入氯仿并離心,RNA位于上層水相。抽提水相,在RNeasy MinElute離心柱上純化RNA,污染物被洗去。du特設(shè)計(jì)的RNeasy MinElute離心柱可用少至10µl洗脫體積濃縮RNA。
操作流程
miRNeasy Micro Kit純化的總RNA包括18個(gè)核苷酸以上的RNA。富含miRNA的組分和總RNA(>200 nt)組分可分開純化。包括miRNA的總RNA非常適合通過real-time RT-PCR的miRNA定量分析。單獨(dú)富含小RNA的組分更適用于某些mRNA和rRNA會(huì)導(dǎo)致更高背景的應(yīng)用。
在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上自動(dòng)純化miRNA
在QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀上可wan全自動(dòng)純化包括miRNA的總RNA。新型QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀采用先進(jìn)技術(shù)處理QIAGEN離心柱,將自動(dòng)化、低通量樣品制備無縫整合到實(shí)驗(yàn)室工作流程中。使用QIAcube全自動(dòng)核酸純化儀的樣品制備流程與手工操作相同(如裂解、結(jié)合、洗滌和洗脫),可使用miRNeasy Micro Kit進(jìn)一步純化高品質(zhì)RNA。
應(yīng)用
miRNeasy Micro Kit可純化包括miRNA的總RNA,用于多種應(yīng)用,包括:
Northern印跡分析
定量real-time RT-PCR(如使用miScript PCR System)
芯片分析
目錄號(hào):217084
品牌:Qiagen
規(guī)格:50Reactions
目錄價(jià):¥4710.00
市場(chǎng)價(jià)格:¥4003.50
會(huì)員價(jià)格:¥4003.50
數(shù)量:
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