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Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒

Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 試劑盒提供了一種通過免疫沉淀（染色質(zhì) IP）高效分離染色質(zhì)結(jié)合 DNA 的便利方法，用于隨后通過 PCR 進(jìn)行定量分析。磁性 ChIP 試劑盒的特點(diǎn)：•快速— 可在約 8 小時內(nèi)獲得適于進(jìn)行定量 PCR 的純化 DNA•高效且可重現(xiàn)—微球菌核酸酶酶切過程和細(xì)胞核裂解過程均經(jīng)高度優(yōu)化•靈敏—只需 10,000 個細(xì)胞 (1 x 10^4) 即可獲得結(jié)果•低背景—Pierce 蛋白 A/G 磁珠已在不含 DNA 的試劑中進(jìn)行封閉，可極大限度地降低背景•全面—包括優(yōu)化的陽性對照試劑：RNA 聚合酶 II 抗體和 GAPDH 啟動子 PCR 引物Pierce 磁性染色質(zhì)免疫沉淀分析 (ChIP) 試劑盒含有足夠的試劑，可使用優(yōu)化的方案采用適當(dāng)對照品進(jìn)行 30 次 ChIP 檢測。試劑盒中包含的試劑可用于裂解細(xì)胞、捕獲蛋白-DNA 復(fù)合物，逆轉(zhuǎn)交聯(lián)以及分離 DNA。封閉 Pierce 蛋白 A/G 磁珠具有ji高的結(jié)合容量和較低的非特異性背景，可與很多種抗體一起使用。這些微珠可與磁力架或自動化平臺（例如，Thermo Scientific KingFisher 儀器）一起用于手動工作流程。還提供經(jīng)驗(yàn)證適用于 ChIP 且具備質(zhì)量保證的抗體，與 Pierce 磁性 ChIP 試劑盒配合使用。包括：試劑盒含有用于染色質(zhì)制備、IP 以及 DNA 純化的試劑，同時也包含陽性對照品（抗體和引物）需要：體內(nèi)交聯(lián)劑（如甲醛）、微量吸頭超聲波儀（如 Misonix™ 超聲波儀 3000）、符合 ChIP 要求的首xuan抗體、目標(biāo) DNA 序列的 PCR 引物、PCR 預(yù)混液（如果需要 qPCR，則含有一種染料，如 SYBR™ Green）和 qPCR 儀器應(yīng)用：• 通過 PCR 或 ChIP-Seq 確定基因組 DNA 上特異性蛋白-DNA 相互作用的位點(diǎn)• 監(jiān)測組蛋白修飾或化學(xué)制劑對 DNA 結(jié)合的影響要想成功進(jìn)行 ChIP 檢測，需要在檢測靶標(biāo)基因組 DNA 之前執(zhí)行多個關(guān)鍵步驟（交聯(lián)、染色質(zhì)制備、免疫沉淀）。單獨(dú)來講，ChIP 實(shí)驗(yàn)方案中的每一步在優(yōu)化時都很費(fèi)時間。Thermo Scientific Pierce 磁性 ChIP 試劑盒簡化了 ChIP 流程，可獲得準(zhǔn)確且可重現(xiàn)的結(jié)果。蛋白-DNA 復(fù)合物首先在體內(nèi)與甲醛交聯(lián)。試劑盒含有的試劑可以裂解細(xì)胞，并可提取和溶解交聯(lián)復(fù)合物。然后，將復(fù)合物和特異性抗體放在一起進(jìn)行孵育，最后用 Pierce 蛋白 A/G 磁珠進(jìn)行分離。在逆轉(zhuǎn)交聯(lián)和酶切蛋白后，純化所得 DNA 片段，然后準(zhǔn)備進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)或定量 PCR。

Thermo Pierce™ 磁性 ChIP 試劑盒

規(guī)格容量（公制）4×10^6 個細(xì)胞/反應(yīng)描述Pierce 磁性 ChIP 試劑盒形式試劑盒產(chǎn)品線Pierce™數(shù)量1 個試劑盒類型磁珠 ChIP 試劑盒足夠用于30 次反應(yīng)產(chǎn)品規(guī)格試劑盒內(nèi)容與儲存• 甘an酸溶液 (10X)，15 mL；在室溫下儲存• PBS (20X)，15 mL；在 4°C 下儲存• Halt™ 蛋白酶和磷酸酶抑制劑混合物，無 EDTA (100X)，1 mL；在 4°C 下儲存• 膜提取緩沖液，10 mL；在 4°C 下儲存• MNase 酶切緩沖液，10 mL；在 4°C 下儲存• DTT (7.7 mg)，凍干，2 個樣品瓶；在室溫或 4°C 下儲存• MNase 終止液，1 mL；在 4°C 下儲存• ChIP 級蛋白 A/G 磁珠，0.7 mL；在 4°C 下儲存• IP 稀釋/洗滌緩沖液 (5X)，40 mL，在 4°C 下儲存• 氯化鈉 (5M)，6 mL；在 4°C 下儲存• IP 洗脫緩沖液 (2X)，4.5 mL；在 4°C 下儲存• 微量離心管，1.5 mL，75 個管；在室溫或 4°C 下儲存• DNA 純化柱和試劑，40 次純化；在室溫或 4°C 下儲存• DNA 純化柱，40 個柱• DNA 柱結(jié)合溶液，30 mL• DNA 柱洗滌液，6 mL• pH 指示劑，0.8 mL• DNA 柱洗脫液，5 mL• 微球菌核酸酶（ChIP 級）(10 U/µL)，50 µL；在-20°C 下儲存• 抗 RNA 聚合酶 II 抗體，25 µL；在-20°C 下儲存• 正常兔 IgG (1 mg/mL)，10 µL；在-20°C 下儲存• 蛋白酶 K (20 mg/mL)，0.25 mL；在-20°C 下儲存• ChIP 陽性對照引物（GAPDH 啟動子，人特異性），100 µL；在 -20°C 下儲存