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天恩澤 熒光及可視化LAMP試劑盒 200601-50，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
產(chǎn)品品牌：天恩澤
產(chǎn)品名稱：熒光及可視化LAMP試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品貨號(hào)：200601-50
運(yùn)輸：低溫
保存：-20℃

天恩澤 熒光及可視化LAMP試劑盒 200601-50

我們上海金山科研平臺(tái)公司作為天恩澤公司的代理商，先簡(jiǎn)單介紹一下天恩澤公司：

北京天恩澤公司的目標(biāo)是研發(fā)出技術(shù)先進(jìn)、質(zhì)量穩(wěn)定、價(jià)格合理的試劑精品。公司的創(chuàng)立宗旨是技術(shù)至上、質(zhì)量至上、服務(wù)至上，公司的產(chǎn)品研發(fā)團(tuán)隊(duì)均為高學(xué)歷并在海外有長(zhǎng)期的科研經(jīng)驗(yàn)；公司的管理團(tuán)隊(duì)已在行業(yè)內(nèi)擁有超過20年管理經(jīng)驗(yàn)；同樣，公司的運(yùn)營(yíng)團(tuán)隊(duì)也有豐富的執(zhí)行經(jīng)驗(yàn)。

北京天恩澤公司充分了解客戶的需求，并努力創(chuàng)新以滿足客戶不斷發(fā)展的需求。我們將與我們的客戶共同成長(zhǎng)，成為生物技術(shù)領(lǐng)域中zhuoyue產(chǎn)品和服務(wù)的jijia提供者。

DNAout、RNAout、Erasol、天凈沙、克必隆、歸去來、好亦多均為天恩澤基因注冊(cè)商標(biāo)(試劑類)。

天恩澤 熒光及可視化LAMP試劑盒 200601-50，產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品品牌：天恩澤

產(chǎn)品名稱：熒光及可視化LAMP試劑盒

產(chǎn)品規(guī)格：50次

產(chǎn)品貨號(hào)：200601-50

產(chǎn)品價(jià)格：1390元

運(yùn)輸：低溫

保存：-20℃

有效期：1年

貨期：1-3天

天恩澤 熒光及可視化LAMP試劑盒 200601-50，產(chǎn)品說明：

本產(chǎn)品是根據(jù)本公司的雙染料LAMP技術(shù)開發(fā)的熒光和可見光雙模式 LAMP擴(kuò)增及檢測(cè)試劑盒，它既可以用于熒光LAMP 擴(kuò)增及檢測(cè)，也可以用于 可視化LAMP 擴(kuò)增及檢測(cè)，適用于各種針對(duì)核酸的快速定性檢測(cè)。本產(chǎn)品具有 下列特點(diǎn)：

1. 一般60分鐘內(nèi)出結(jié)果（取決于靶分子濃度），比PCR快約1小時(shí)。

2. 對(duì)20 μL的反應(yīng)體系，可以樣品加樣量達(dá)到14 μL。

3. 含可見光和熒光染料，既可以用金屬浴和水浴擴(kuò)增用可見光肉眼判斷結(jié)果， 也可用熒光PCR儀進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)。

4. 內(nèi)含的dUTP-UNG可防交叉污染。

5. 特異性比PCR高，因?yàn)長(zhǎng)AMP 擴(kuò)增使用4-6條引物而不是兩條。

6. 靈敏性可達(dá)10拷貝/反應(yīng)以下（隨引物而不同），故假陰性率更低。

7. 本產(chǎn)品跟北京天恩澤的多種免提取試劑盒（如免提病毒保存液）兼容。

8. 只可用于科研，只可進(jìn)行定性檢測(cè)，不能用于定量檢測(cè)。

9. 本產(chǎn)品只適用于LAMP 檢測(cè)，不適用于進(jìn)行RT-LAMP檢測(cè)。

10. 本產(chǎn)品足夠50次20 μL體系的熒光及可視化LAMP 擴(kuò)增。

天恩澤 熒光及可視化LAMP試劑盒 200601-50，產(chǎn)品規(guī)格：

運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為一年。

使用方法：

自備試劑 ：LAMP模板及LAMP引物、PCR級(jí)石蠟油（僅對(duì)使用金屬浴或水浴者）。

準(zhǔn)備工作：如果使用水浴鍋或金屬浴，需要在實(shí)驗(yàn)啟動(dòng)前打開并調(diào)到65℃。如 果用金屬浴，還必須在孔中加水以填充金屬孔和反應(yīng)管間的空隙。本公司發(fā)現(xiàn) 很多水浴鍋或金屬浴溫度不準(zhǔn)，故建議先用陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照測(cè)試所用儀器 在60℃、62.5℃、65℃、67.5℃和70℃五個(gè)溫度下擴(kuò)增效果，選擇陽(yáng)性和陰 性顏色差異ji大的溫度進(jìn)行擴(kuò)增。

一、樣品DNA的制備 1. 用自選方法純化樣品DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)DNA提取試劑盒兼 容，可以選購(gòu)本公司的各種免提取試劑盒。 2. 如果有 N 個(gè)樣品，則至少需要做 N+2 個(gè)樣品制備，包括一個(gè)制備陽(yáng)性對(duì) 照（制備時(shí)加入自備的跟要檢測(cè)的靶分子相同的陽(yáng)性對(duì)照模板，一起經(jīng)歷提取過程）和一個(gè)制備陰性對(duì)照（用水替代樣品）。ran后N+2個(gè)樣品一起 進(jìn)行DNA提取操作，得到N+2個(gè)DNA樣品。

二、配制并測(cè)試自備的20×LAMP引物混合液 3. 用超純水將自備的6種（或4種）LAMP 引物干粉稀釋到母液濃度（100 μM），然后按下表配制100μL的20×LAMP 引物混合液，此混合液足夠 100次20 μL體系的LAMP擴(kuò)增。如果需要配制的20×LAMP 引物混合 液體積異于 100 μL，則各成分的用量請(qǐng)按比例調(diào)整。引物混合液可以在 -20℃放置2年。

注意：總體積為100 μL。如果自備的LAMP引物不含Loop引物，則按上 表配制時(shí)Loop用超純水替代，使得總體積為100 μL。 4. 測(cè)試引物的非特異擴(kuò)增：在加模板和不加模板（至少1000拷貝/反應(yīng)）的 LAMP 系統(tǒng)中測(cè)試引物效果，引物選擇標(biāo)準(zhǔn)可以自己掌握，可以選擇無模 板反應(yīng)的Ct值比有模板反應(yīng)的Ct值大60以上（每個(gè)循環(huán)1 分鐘）的引 物對(duì)。根據(jù)結(jié)果設(shè)定判斷陰性和陽(yáng)性結(jié)果的閾值（本產(chǎn)品只用于定性）。 如果沒有 qPCR儀器，只能用肉眼檢測(cè)，則無需設(shè)定閾值，屆時(shí)靠跟陽(yáng)性 對(duì)照和陰性對(duì)照管的顏色來判斷。

LAMP擴(kuò)增（20 μL體系）

反應(yīng)設(shè)置：如果有 N+2 個(gè) DNA 純化樣品，則可以設(shè)置 N+5 個(gè)LAMP 擴(kuò) 增，增加擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照、無模板對(duì)照和無引物對(duì)照各1個(gè)。在 N+5個(gè)0.2mL 的PCR管中加入下列成分：

6. 混勻后進(jìn)行擴(kuò)增，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件選擇下列兩種方式進(jìn)行擴(kuò)增和檢測(cè)。

7. 如使用金屬浴、水浴或普通無熱蓋 PCR 儀，則每管加 30μL 石蠟油，再 65℃保溫120分鐘。如不加石蠟油，保溫期間水分蒸發(fā)，會(huì)有非特異擴(kuò)增。

8. 如果使用熒光定量 PCR 儀：聚合溫度設(shè)為 65℃，1 次循環(huán) 1 分鐘，120 個(gè)循環(huán)，每分鐘在FAM通道采集一次熒光信號(hào)。 三、結(jié)果分析及解讀 9. 閾值設(shè)定：在*分鐘熒光值會(huì)升高再穩(wěn)定，故只能取第10到15分鐘 的熒光值作閾值。此現(xiàn)象估計(jì)是常溫下可見光染料和熒光染料結(jié)合并對(duì)后 者有淬滅作用，加熱到65℃后兩種染料分開，淬滅逐漸解除，熒光逐漸升 高，10分鐘后穩(wěn)定。沒加可見光染料的反應(yīng)無此現(xiàn)象。 10. 所有陽(yáng)性對(duì)照有陽(yáng)性結(jié)果（Ct 在60以內(nèi)或反應(yīng)液呈藍(lán)色），所有陰性對(duì) 照有陰性結(jié)果（Ct 大于60 或反應(yīng)液呈淡藍(lán)色），否則提取實(shí)驗(yàn)或擴(kuò)增實(shí) 驗(yàn)無效。需要尋找原因或跟廠家聯(lián)系，暫時(shí)不需要分析樣品的結(jié)果。 11. 如果陽(yáng)性和陰性對(duì)照結(jié)果正常，則實(shí)驗(yàn)有效，可以分析樣品的情況。如果 肉眼觀察，樣品管的顏色接近擴(kuò)增陽(yáng)性對(duì)照管則說明有擴(kuò)增有靶分子，如 果接近無模板和無引物的陰性對(duì)照，則說明無擴(kuò)增無靶分子。反應(yīng)結(jié)果示 例如下（9為陰性，10為陽(yáng)性）

12. 如果是用熒光PCR儀，樣品Ct將小于閾值則為陽(yáng)性，大于閾值則為陰性。

13. 當(dāng)實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)和可視化檢測(cè)同時(shí)使用時(shí)，如果不一致，以實(shí)時(shí)熒光LAMP 的數(shù)據(jù)為準(zhǔn)。一般可視化結(jié)果滯后實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)結(jié)果20-30分鐘，也就是 說，在 qPCR 儀上第 30 分鐘時(shí)呈現(xiàn)陽(yáng)性的樣品，其顏色變化在第 50-60 分鐘時(shí)才能觀察到。

關(guān)聯(lián)產(chǎn)品：免核酸純化病毒保存液，PCR級(jí)石蠟油

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