人妻一区二区中文字幕在线-大肉棒抽插小嫩穴视频免费-国产福利萌白酱视频资源福利-最新国产主播一区二区-伊人五月天婷婷成人-色av中文字幕在线-美女打开小穴让男生操的视频-国产又长又粗又长又爽毛片-人人妻人人澡人人爽欧美三区

BCECF-AM試劑貨號(hào)：B262 3′-O-Acetyl-2′,7′-bis(carboxyethyl)-4 or 5-carboxyfluorescein, diacetoxymethyl ester CAS號(hào)：117464-70-7 商品信息 儲(chǔ)存條件：-20度保存，避光 運(yùn)輸條件：室溫 分子式：

C₃₅H₂₈O₁₅

分子量：

688.59

特點(diǎn)：

● 水溶性好，可進(jìn)入細(xì)胞膜

● 熒光強(qiáng)度高

選擇規(guī)格： 1mg

湊單關(guān)聯(lián)產(chǎn)品TOP5

NO.1.Annexin V, FITC Apoptosis Detection Kit細(xì)胞凋亡檢測(cè)

NO.2. Cell Counting Kit-8 細(xì)胞增殖毒性檢測(cè)

NO.3. Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST乳酸脫氫酶(LDH)檢測(cè)

NO.4. Cell Viability Assay Kit細(xì)胞增殖/毒性檢測(cè)

NO.5. Fluo 4-AM special packaging細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測(cè)

規(guī)格性狀

規(guī)格

特性：該產(chǎn)物為淺橙色至淺橙色棕色粉末或固體，可溶于DMSO和乙腈。

純度(HPLC)：90%以上

熒光光譜：試驗(yàn)成功

NMR光譜：試驗(yàn)成功

產(chǎn)品概述

BCECF被廣泛地用于細(xì)胞內(nèi)pH的測(cè)定。Tsien博士和其他人通過加入2個(gè)額外的羧化物基團(tuán)改進(jìn)了這種羧基熒光素。加入的兩個(gè)羧基使得它能更好地被固定在細(xì)胞內(nèi)。BCECF具有很好的水溶性，是因?yàn)樗谥行詐H時(shí)帶有4-5個(gè)負(fù)電荷。但是BCECF卻很難穿過細(xì)胞膜進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)。它的pKa值為6.97，高于其它的羧基熒光素。BCECF在激發(fā)光譜439nm處有等吸收點(diǎn)，因此它能和Fura 2一樣可用比率法測(cè)定。505nm和439nm通常是非常有用的用于比率測(cè)量的波長(zhǎng)，一般會(huì)將490nm和450nm的濾光片加在激發(fā)光源的前面。而530nm的濾光片則是用來查看它的熒光信號(hào)的。這里要注意的是激發(fā)光譜與吸收光譜有一些細(xì)微的區(qū)別。BCECF-AM是乙酰甲酯化的BCECF。它能夠輕易地進(jìn)入到細(xì)胞內(nèi)。就和其他的乙酰甲酯類一樣，BCECF-AM只需要通過孵育就能進(jìn)入細(xì)胞。BCECF-AM對(duì)潮濕非常敏感，所以要小心保存。如果DMSO儲(chǔ)存液的顏色從淺黃色變?yōu)樯畛壬痛砹薃M的分解。所以通過對(duì)顏色變化的觀測(cè)，能判斷AM酯的水解情況。

產(chǎn)品特性

BCECF-AM是一種對(duì)細(xì)胞內(nèi)pH敏感的新型熒光探針，分別用490nm和440nm波長(zhǎng)激發(fā)BCECF所得到的發(fā)射熒光之比與pH有很好的線性關(guān)系。BCECF-AM是乙酰甲酯化的BCECF，BCECF-AM是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料，BCECF-AM沒有熒光，進(jìn)入細(xì)胞后被細(xì)胞內(nèi)的酯酶水解成BCECF，從而被留在細(xì)胞內(nèi)。BCECF在適當(dāng)?shù)膒H值情況下可以被激發(fā)形成綠色熒光。BCECF-AM不僅被廣泛用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的研究，也有報(bào)道用于動(dòng)物組織、植物細(xì)胞、細(xì)菌和酵母等的細(xì)胞內(nèi)pH水平檢測(cè)。在有細(xì)胞內(nèi)pH變化的細(xì)胞毒性、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞粘附、藥物抵抗、細(xì)胞趨化等過程中BCECF AM被廣泛應(yīng)用。BCECF-AM(pH熒光探針)需用無水DMSO(anhydrous DMSO)配制。

操作說明

試劑 (溶解方法):

1.45 mM的BCECF-AM/DMSO溶液(將1 mg 的BCECF-AM溶于1mlDMSO)HEPES緩沖液(20mM HEPES，153mM NaCl，5mM KCl，5mM glucose，pH7.4)

操作：

1.用HEPES制備細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度為4×10⁷個(gè)/ml。

2.將1.45 mM的BCECF-AM/DMSO溶液加入細(xì)胞懸液中 (細(xì)胞懸液的1/300體積)，BCECF-AM終濃度為3mM。

3.37℃培養(yǎng)30min。

4.用HEPES緩沖液清洗細(xì)胞3次，制成3×10⁶個(gè)/ml的細(xì)胞懸液。

5.使用熒光顯微鏡或帶有圖像分析系統(tǒng)的激光共聚焦顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞的熒光強(qiáng)度。

*標(biāo)記的條件因細(xì)胞種類而異，在每次實(shí)驗(yàn)前，請(qǐng)先確定最佳條件。以上方法僅供參考。