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一、轉(zhuǎn)染步驟：

1、質(zhì)粒提取：使用無內(nèi)毒素提取試劑盒

2、質(zhì)粒溶解：溶于超純水或雙蒸水，一定不能溶于試劑盒Buffer等其他試劑

3、質(zhì)粒熒光：若質(zhì)粒不帶熒光、請使用熒光對照，方便查看轉(zhuǎn)染效率

4、質(zhì)粒濃度：500-600ng/ul

5、質(zhì)粒和轉(zhuǎn)染試劑復合物制備：質(zhì)粒8ug和轉(zhuǎn)染試劑8ul，吹打混勻室溫靜置15分鐘，無需也不能另外加入任何試劑稀釋

6、細胞轉(zhuǎn)染前狀態(tài)：拍照片留存

7、貼壁細胞鋪板：6孔板完全培養(yǎng)基2ml、培養(yǎng)基中不加雙抗，細胞密度：60%左右（不同細胞，按48小時生長到90%，往前推算細胞鋪板密度）

8、轉(zhuǎn)染：將復合物加入輕搖混勻、培養(yǎng)箱培養(yǎng)

9、換液：轉(zhuǎn)染24小時后培養(yǎng)基換液

10、轉(zhuǎn)染效率：轉(zhuǎn)染48小時后拍熒光照片，查看轉(zhuǎn)染效率

11、轉(zhuǎn)染后細胞狀態(tài)：拍明場細胞狀態(tài)照片

12、檢測：總計轉(zhuǎn)染48小時后提取RNA或蛋白檢測