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品牌: biolzy 公司: 上海聯(lián)碩生物科技有限公司

服務(wù)名稱： 流式細(xì)胞術(shù)檢測技術(shù)服務(wù)

產(chǎn)品詳情請聯(lián)系金山科研平臺微信：jinshanbio
流式細(xì)胞術(shù)檢測技術(shù)服務(wù) 作者：聯(lián)碩生物1、檢測項目：(1)細(xì)胞周期細(xì)胞（2）細(xì)胞凋亡(3)免疫細(xì)胞分型(4)表面抗原鑒定(5)細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測(6)線粒體功能(7)細(xì)胞分選2、樣本及來源：1)單個細(xì)胞：1~2×106個細(xì)胞左右；來源于人、小鼠、大鼠或其它。2)外周血：EDTA或肝素抗凝全血，5ml左右；來源于人、小鼠、大鼠或其它。說明：1、實驗所用的流式細(xì)胞儀為COULTEREPICSXL。2、送檢樣本量：1)、單個細(xì)胞：1~2×106個細(xì)胞左右；來源于人、小鼠、大鼠或其它。2)、外周血：EDTA或肝素抗凝全血，5ml左右；來源于人、小鼠、大鼠或其它。3、用戶需要進行流式細(xì)胞儀檢測時須提前預(yù)約，同時說明實驗?zāi)康摹⒎椒ǖ取Ｒ淮嗡蜋z標(biāo)本數(shù)不少于10個。如果一次送檢標(biāo)本總數(shù)不足10個，每個測試費用為標(biāo)準(zhǔn)收費×2。4、我公司在正式接受實驗委托一周內(nèi)交付實驗結(jié)果。所提供實驗結(jié)果忠實于樣本的實際情況。5、用戶須一次性全額預(yù)付實驗費。6、部分常用熒光探針，如PI等，我公司可免費提供，；特殊標(biāo)記物，如CD抗體等，用戶須另行購買，也可委托我公司代購；用戶所提供抗體應(yīng)可與樣本發(fā)生特異性識別反應(yīng)。7、由用戶提供的樣品或試劑所致的實驗問題由用戶負(fù)責(zé)。8、請在表中說明檢測具體要求（可另附頁），由于填寫資料不詳所致任何問題由用戶負(fù)責(zé)。9、請在送樣的同時提供樣本來源及處理方法等信息，樣品檢測后原則上本公司不負(fù)責(zé)保存。客戶提供：（1）標(biāo)本:組織、細(xì)胞、全血（抗凝）（2）抗體（熒光素標(biāo)記）PE最強，適用于弱表達抗原FITC最便宜，適用于強表達抗原，適用范圍廣biotin-avidin不適合弱抗原的檢測（3）其他試劑（如Fluo-3）（4）染色試劑盒附：流式細(xì)胞術(shù)檢測樣品推薦制備方法：A.直接標(biāo)記抗體（FITC標(biāo)記抗體）：(1)、收集1×106個細(xì)胞，800rpm離心5min，4℃以上冷PBS洗一次。(2)、用4%多聚甲醛1ml室溫固定40分鐘，800rpm離心5min去上清。加2mlPBS重懸洗滌細(xì)胞，800rpm離心5min。(3)、用1ml含5%人血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上孵育10min，800rpm離心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA和飽和劑量的熒光標(biāo)記抗體(5×105個細(xì)胞/20ul抗體)的PBS,避光冰上放置30min,離心棄上清。加入200ul1%多聚甲醛固定，待測即可。(4)、用流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10000個細(xì)胞。B.未標(biāo)記抗體間接免疫熒光標(biāo)記法：(1)、收集2×106個細(xì)胞，用冷的PBS2ml洗滌細(xì)胞一次，800rpm離心5min。(2)、用2ml4%多聚甲醛室溫固定細(xì)胞40min,800rpm離心5min；2mlPBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min；(3)、用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重懸細(xì)胞，冰上放置10min,800rpm離心5min。(4)、加入飽和劑量未標(biāo)記抗體，冰上放置40min,800rpm離心5min，用2ml冷的PBS重懸細(xì)胞，800rpm離心5min，洗去未結(jié)合一抗，重復(fù)一次。(5)、加入熒光標(biāo)記（FITC）標(biāo)記的二抗，冰上避光放置40min后，800rpm離心5min，去上清，PBS洗滌兩次。(6)、加入0.5ml1%多聚甲醛重懸細(xì)胞；固定待測。(7)、流式細(xì)胞儀檢測熒光值,每管計數(shù)10000個細(xì)胞。C.細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡及DNA倍體分析樣品（PI染色）的制備：(1)、待測樣本制成單細(xì)胞懸液，然后2000轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，棄上清。(2)、用4℃預(yù)冷的70%冷乙醇固定，4℃保存，至少固定18小時。(3)、調(diào)整細(xì)胞濃度為106細(xì)胞/毫升，取1毫升細(xì)胞懸液，用PBS洗三次，細(xì)胞重懸于1毫升PI染液中，37℃孵育30分鐘即可進行流式分析。(4)、PI染液終濃度為50微克/毫升，RNaseA終濃度為20微克/毫升。注：本方法僅供參考，如有其它要求，請在送樣前說明。

服務(wù)項目樣品外理應(yīng)用的試劑收費細(xì)胞周期細(xì)胞細(xì)胞——胰酶消化——PBS洗——70%乙醇4℃固定過夜（不超過一周）RNA酶，PI染料<10個樣品，80元/個>10個樣品，60元/個試劑費已包括。細(xì)胞凋亡新鮮培養(yǎng)的細(xì)胞AnnexinV-FITC細(xì)胞凋亡檢測試劑盒<10個樣品，150元/樣品>10個樣品，120元/樣品已包括試劑費用，客戶提供試劑可減20元另需細(xì)胞培養(yǎng)費用。免疫細(xì)胞分型培養(yǎng)的細(xì)胞：如白血病細(xì)胞，客戶刺激好的細(xì)胞、抗凝全血、脾勻漿破膜劑，固定劑，刺激劑、特異性抗體（需客戶提供）雙染：<10個樣品，120元/樣品>10個樣品，100元/樣品三染：在原來基礎(chǔ)上加30元需要分離細(xì)胞、培養(yǎng)、刺激的具體情況另記表面抗原鑒定培養(yǎng)的細(xì)胞特異性抗體（需客戶提供）單染：<10個樣品，80元/樣品>10個樣品，60元/樣品雙染：在原來基礎(chǔ)上加30元三染：在原來基礎(chǔ)上加30元細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測培養(yǎng)的細(xì)胞Fluo-3AM(鈣離子熒光探針)<10個樣品，100元/樣>10個樣品，80元/樣品（已包含試劑）線粒體功能僅適用于懸浮或貼壁培養(yǎng)的新鮮細(xì)胞客戶提供試劑盒檢測費可同細(xì)胞周期細(xì)胞分選收費：標(biāo)記費用+分選儀使用費用價格體系類似于共聚焦