品牌: wanleibio
公司: 沈陽萬類生物科技有限公司
貨號(hào)： WLA019b 保存條件： -20℃ 規(guī)格： 100T（促銷）
產(chǎn)品詳情請(qǐng)聯(lián)系金山科研平臺(tái)微信：jinshanbio 產(chǎn)品名稱： 全蛋白提取試劑盒產(chǎn)品概述： 全蛋白提取試劑盒（Whole Cell Lysis Assay）可用于從哺乳動(dòng)物組織和細(xì)胞中提取全蛋白，用含有蛋白酶抑制劑的裂解緩沖液Lysis Buffer勻漿裂解組織或細(xì)胞，提取過程簡便高效。獲得的全蛋白可用于Western Blot、IP等后續(xù)研究，但不能用于蛋白激酶及磷酸酶免疫共沉淀的研究。保存條件:-20℃保存，本試劑盒自訂購之日起一年內(nèi)有效。操作流程:Ⅰ細(xì)胞蛋白提取1.貼壁細(xì)胞 ：用預(yù)冷的1x PBS洗2-3次， 以洗去培養(yǎng)液。2. 懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至預(yù)冷的離心管中，離心10min（1000rpm）后，棄上清。 3. 將預(yù)冷的Lysis Buffer按每1ml加入10μl PMSF的比例混勻備用，Lysis Buffer加入量參考下表。
培養(yǎng)板規(guī)格細(xì)胞數(shù)量Lysis Buffer加入量100mm（培養(yǎng)皿）5x10 6個(gè)600μl35mm（6孔板）1x10 6個(gè)200μl（每孔）
4. 用細(xì)胞刮（沉淀振蕩）充分破碎細(xì)胞，將其倒入離心管中超聲；如果沒有超聲儀，冰上裂解 30min。5.12000rpm，4℃離心 , 10min，上清為全蛋白提取物，可進(jìn)行蛋白定量。6. 分裝保存于-70℃，避免反復(fù)凍融。Ⅱ組織蛋白的提取1. 取新鮮組織 , 用預(yù)冷的1xPBS洗2-3次。2. 將組織剪成小塊 , 放入預(yù)冷的研缽中 , 倒入液氮充分研碎。3. 將預(yù)冷的Lysis Buffer按每 1ml 加入10μl PMSF的比例混勻備用。4. 每100mg組織應(yīng)加入0.5-1ml Lysis Buffer，充分研磨。如果粘度過大則再需加入一定量Lysis Buffer 再次研磨，之后進(jìn)行超聲。5.12000rpm，4℃離心 , 10min，上清為全蛋白提取物，可進(jìn)行蛋白定量。6. 分裝保存于-70℃，避免反復(fù)凍融。詳情請(qǐng)致電咨詢：400-602-0407（轉(zhuǎn)2號(hào)鍵）或登錄公司官網(wǎng)www.wanleibio.cn 溫馨提示：不可用于臨床治療。
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