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伯樂CFX Duet實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀配置方案-

2023-04-02

主要功能用途

Bio-Rad CFX Duet實(shí)時(shí)熒光定量 PCR是2022 年5月新上市的小型經(jīng)濟(jì)型雙色qPCR系統(tǒng),秉承CFX Opus 系統(tǒng)的強(qiáng)大溫控性能、精準(zhǔn)光梭檢測系統(tǒng),具有單重singleplex或雙重?zé)晒舛?PCR 檢測(duplex assays)功能。適用于基因表達(dá)分析、基因分型(Genotyping)、靶序列定量和蛋白質(zhì)熱移檢測(Protein thermal shift assays)等多樣化研究應(yīng)用。

主要應(yīng)用包括:

1、基因表達(dá)水平定量分析

在生理、病理、環(huán)境脅迫以及SiRNA誘導(dǎo)基因沉默和基因敲除后動(dòng)植物組織細(xì)胞及微生物特定基因表達(dá)水平的檢測。

2、基因突變的檢測

常用于SNP基因型分析(SNP genotyping)和拷貝數(shù)變異(Copy number variation, CNV)檢測。

3、病原體檢測(Pathogen detection)

用于臨床醫(yī)學(xué)上呼吸道的感染、肺炎、消化道感染、中樞神經(jīng)系統(tǒng)等疾病,以及畜牧業(yè)、農(nóng)作物病蟲害的病原體的檢測確認(rèn)、感染嚴(yán)重程度的量化評(píng)估。

4、高分辨率溶解曲線分析(High resolution melt, HRM)

高分辨熔解曲線(high-resolution melt,HRM) 分析是通過實(shí)時(shí)監(jiān)測升溫過程中與雙鏈DNA特異性結(jié)合的熒光染料釋放的綠色熒光強(qiáng)度的變化,了解PCR 產(chǎn)物中DNA分子的解鏈溫度情況,分析樣品特定基因片段DNA組成變化。

5、miRNA表達(dá)水平的檢測

基于miRNA與特定靶基因mRNA表達(dá)水平變化間的關(guān)聯(lián),研究miRNA 調(diào)控基因表達(dá)機(jī)制。

6、藥物研究

實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)應(yīng)用藥理作用分子機(jī)制分析、藥物作用靶點(diǎn)分析、耐藥基因檢測以及藥代動(dòng)力學(xué)相關(guān)基因的多態(tài)性研究。

7、蛋白熱漂移實(shí)驗(yàn)(Thermal shift assay, TSA )

蛋白質(zhì)與配體的復(fù)合物在加熱過程會(huì)導(dǎo)蛋白質(zhì)變性、熔解和復(fù)合物的解離,導(dǎo)致蛋白折疊結(jié)構(gòu)中的疏水基團(tuán)暴露。暴露疏水基團(tuán)與測試添加的熒光染料SYPRO Orange相結(jié)合,而提高熒光染料的發(fā)射強(qiáng)度。借助于實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀的溶解曲線分析功能,通過檢測反應(yīng)體系中蛋白熒光強(qiáng)度,生成蛋白-配體復(fù)合物的熒光-溫度曲線圖。據(jù)此。測定蛋白質(zhì)在不同環(huán)境下熱變性溫度的變化, 檢測小分子與目標(biāo)蛋白的結(jié)合,評(píng)估候選藥物和蛋白可能的配體大規(guī)模篩選。

性能特點(diǎn)

伯樂CFX Duet實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀秉承CFX Opus 96 qPCR系統(tǒng)的蜂巢式樣品模塊和樣品溫度梯度控制技術(shù)(可編程溫度梯度,可快速確定最佳退火溫度annealing temperatures)、新型推拉熱蓋和光梭式精準(zhǔn)檢測模塊,消除了不同樣品孔熒光信號(hào)光程誤差和孔間熒光信號(hào)竄擾,無須使用ROX校正。全新CFX Maestro Software整合聯(lián)機(jī)控制和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析功能,一鍵式數(shù)據(jù)收集、數(shù)據(jù)分析和導(dǎo)出。

1、雙重?zé)晒鈾z測

CFX Duet實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 系統(tǒng),采用雙通道光學(xué)元件,并在出廠前預(yù)先針對(duì)SYBR Green等常見染料進(jìn)行了校準(zhǔn),允許在基因分型和多基因表達(dá)分析中定量多達(dá)兩個(gè)靶標(biāo)。

2、CFX Maestro軟件整合聯(lián)機(jī)控制和數(shù)據(jù)分析功能

CFX Duet通過USB 端口與計(jì)算機(jī)聯(lián)機(jī),采用CFX Maestro軟件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)置和分析,并提供自定義報(bào)告,而無需將數(shù)據(jù)導(dǎo)出到其他程序。

整合 PrimePCR Assays,設(shè)計(jì)和驗(yàn)證的 PrimePCR引物;

具有包括 t- 檢驗(yàn)、方差分析在內(nèi)的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析模塊;

提供中文CFX Maestro Software和安全版本CFX Maestro Security Edition Software。CFX Maestro 安全版軟件提供和 CFX Maestro 軟件一樣的功能,提供審計(jì)和電子簽名(Audit and e-signature)安全環(huán)境,符合美國 FDA 21 CFR Part 11 法規(guī)。

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